| 鲤疱疹病毒2型和3型三重PCR检测方法的建立与应用 |
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| 作者姓名： | 彭军辉 安伟 张明辉 |
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| 作者单位： | 上海市水产研究所 上海市水产技术推广站 上海 200433 |
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| 摘 要： | 鲤疱疹病毒2型和3型主要感染鲫(金)鱼(Carassius auratus)、鲤鱼(Cyprinus carpio)和锦鲤(Cyprinus carpio haematopterus)及其杂交种，具有高度的传染性和致病性，对养殖鲤科鱼类危害严重。为了建立快捷、高效且能同时检测这2种类型鲤疱疹病毒的检测技术，本研究根据鲤疱疹病毒的DNA聚合酶基因(2、3型)、解旋酶基因(2型)和胸苷激酶基因(3型)的保守序列，设计了3对特异性引物，通过对三重PCR的反应条件进行优化，建立起鲤疱疹病毒2型和3型三重PCR检测方法，并运用该方法对实验室保存的鲫鱼和鲤鱼组织样品进行检测。结果显示，该三重PCR检测方法仅在鲤疱疹病毒阳性样品中扩增出3条特异性条带，表现出良好的特异性；以克隆的目的基因质粒为模板，进行10倍梯度稀释，该检测方法能检出的极限值为2.85×102 copies/μL，表现出较高的灵敏性；运用该方法检测122份鲫鱼和60份鲤鱼样品，其结果与运用国家标准(GB/T 36194-2018)和行业标准(SC/T 7212.1-2011)方法检测的结果一致。本研究表明，构建的三重PCR检测方法不仅具有较高的准确性和灵敏度，还能同时检测2种类型的鲤疱疹病毒，有效提高检测效率。
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| 关 键 词： | 鲤疱疹病毒 三重PCR 鲫(金)鱼 鲤鱼 |
| 收稿时间： | 2020/11/24 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2021/1/7 0:00:00 |
Establishment and application of the triplex PCR method for simultaneous detection of Cyprinid herpesvirus 2 and Cyprinid herpesvirus 3 |
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| Authors: | PENG Junhui AN Wei ZHANG Minghui |
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| Institution: | Shanghai Fisheries Research Institute, Shanghai Fisheries Technical Extension Station, Shanghai 200433, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cyprinid herpesvirus Triplex PCR Carassius auratus Cyprinus carpio |
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