中华鳖MHCⅡα基因cDNA的克隆及组织表达分析

为了探究中华鳖(Pelodiscus sinensis)的主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)的结构和功能，本研究利用RACE技术成功克隆获得中华鳖MHCⅡα基因的cDNA全长序列，其长度为1296 bp，开放阅读框(ORF)为807 bp，共编码268个氨基酸，分为信号肽序列、Ⅱ类组织相容性抗原α结构域、IGc1结构域及跨膜结构域4个功能结构域。通过NJ法构建的系统进化树分析显示，中华鳖与西部锦龟(Chrysemys picta bellii)亲缘较近，而与哺乳类、鸟类及鱼类亲缘关系较远。荧光定量PCR结果显示，MHCⅡα mRNA在中华鳖8个组织中均有表达，在脾、心、肝及肠组织中表达水平较高，在肌肉组织中表达量最低。感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) 12 h后，中华鳖MHCⅡα mRNA在肝和肠组织中的表达显著上调；感染1 d时，在脾组织中的表达显著上调；感染1 d及5 d时，在肾组织中的表达显著上调。研究表明，中华鳖MHCⅡα基因参与了中华鳖免疫反应。