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中华鳖GHITM cDNA基因克隆及表达分析
作者姓名:熊钢  周先文  马晓  曾丹  陈贞年  康骊  王晓清
作者单位:湖南生物机电职业技术学院动物科技系 长沙410127;湖南农业大学动物科技学院 长沙410128;湖南农业大学动物科技学院 长沙410128;河南师范大学水产学院 新乡 453007;湖南生物机电职业技术学院动物科技系 长沙410127
基金项目:国家自然科学基金;湖南省自然科学基金;湖南省自然科学基金;湖南省教育厅项目
摘    要:为研究GHITM基因在中华鳖(Trionyx sinensis)胚胎发育及生长中的作用,本研究通过RT-PCR和RACE方法获得了中华鳖GHITM全长cDNA序列;采用实时荧光定量PCR对GHITM mRNA组织表达及不同温度孵化胚胎发育过程中的表达特性进行分析。结果显示,中华鳖GHITM cDNA序列长度为2650 bp,开放阅读框为1050 bp,5?非编码区为123 bp,3?非编码区为1477 bp,编码349个氨基酸,编码蛋白的等电点为10.01,分子量为37.12 kDa。GHITM编码氨基酸序列由胞外区、跨膜区和胞内区组成,7个跨膜域组成跨膜区。GHITM编码氨基酸序列的同源性分析显示,中华鳖与锦龟(Chrysemys picta bellii)和绿海龟(Chelonia mydas)同属一个分支,3种鳄鱼构成一个分支,7种鸟类形成一个分支。实时荧光定量检测显示,GHITM基因在肝脏、肌肉和脑垂体中的表达水平较高,显著高于心脏、性腺、肠、肾脏和脾脏组织(P<0.05);50 g左右和500 g左右雄性个体肝脏中的GHITM基因表达量显著高于雌性个体(P<0.05);低温胁迫孵化能显著抑制胚胎肝脏中GHITM基因的表达(P<0.05)。上述研究结果表明,GHITM基因与中华鳖生长和胚胎发育密切相关,其在中华鳖胚胎中的表达受孵化温度调节。本研究为探讨中华鳖胚胎发育和生长提供理论依据。

关 键 词:中华鳖  GHITM  基因克隆  胚胎发育  组织表达
收稿时间:2018/9/6 0:00:00
修稿时间:2018/10/21 0:00:00

Molecular Cloning and Expression Analysis of HGITM cDNA in Trionyx sinensis
Authors:XIONG Gang  ZHOU Xianwen  MA Xiao  ZENG Dan  CHEN Zhennian  KANG Li and WANG Xiaoqing
Institution:Department of Animal Science and Technology, Hunan Biological and Electromechanical Polytechnic, Changsha 410127; College of Animal Science and Technology, Hunan Agriculture University, Changsha 410128,College of Animal Science and Technology, Hunan Agriculture University, Changsha 410128,College of Fisheries, Henan Normal University, Xinxiang 453007,College of Animal Science and Technology, Hunan Agriculture University, Changsha 410128,College of Animal Science and Technology, Hunan Agriculture University, Changsha 410128,Department of Animal Science and Technology, Hunan Biological and Electromechanical Polytechnic, Changsha 410127 and College of Animal Science and Technology, Hunan Agriculture University, Changsha 410128
Abstract:
Keywords:Trionyx sinensis  GHITM  Gene cloning  Embryonic development  Tissue expression
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