稀有鱼句鲫β肌动蛋白启动子的克隆及其驱动活性的初步检测 |
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作者姓名: | 叶斐菲 刘红 蔡生力 王豪杰 李媛媛 |
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作者单位: | 上海海洋大学,农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室,201306 |
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基金项目: | 上海市教育委员会重点学科建设项目(项目编号:J50701)资助 |
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摘 要: | 稀有鮈鲫是一种新型的模式实验鱼,具有利用转基因技术培育开发成为观赏性鱼类的潜在可能。本实验采用PCR方法,从稀有鮈鲫基因组DNA中分离得到大小为1584bp的β肌动蛋白(β-actin)基因片段。序列分析表明,该片段包括长为1507bp的启动调控区和77bp的部分转录区序列。启动调控区包括一段长为109bpβ-actin基因上游调控序列,不翻译的外显子1和内含子1。上游调控序列中含有TATAbox,CAATbox和CArGbox等与转录活性密切相关的作用元件,并且在稀有鮈鲫β-actin基因第一个内含子中也含有1个CArG调控元件。将该启动子片段克隆到绿色荧光表达载体(pAcGFP1-1)上,显微注射入稀有鮈鲫的受精卵中,通过荧光显微镜能观察到绿色荧光蛋白的表达。本实验成功分离了具有驱动活性的稀有鮈鲫β-actin基因启动子。
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关 键 词: | 稀有鮈鲫 β-肌动蛋白 启动子 序列分析 转基因 绿色荧光蛋白 |
收稿时间: | 2009/9/23 0:00:00 |
修稿时间: | 2009/12/31 0:00:00 |
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