牙鲆JNK2基因的表达分析及免疫功能探究 |
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作者姓名: | 司瑜 王宣刚 王梦娅 王欣桐 于海洋 张全启 王志刚 |
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作者单位: | 中国海洋大学海洋生命学院 海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室 青岛 266003 |
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摘 要: | 本研究利用实验室已建牙鲆(Paralichthys olivaceus)转录组数据库,得到牙鲆JNK2基因(PoJNK2)并利用PCR技术进行序列验证。PoJNK2的开放阅读框长度为1263 bp,编码420个氨基酸;通过SMART服务器对PoJNK2的结构域进行预测,显示PoJNK2具有典型的丝氨酸?苏氨酸蛋白激酶催化结构域S_TKc。利用qRT-PCR分析PoJNK2在牙鲆成体不同组织中的表达水平,发现其在牙鲆免疫组织中均有表达,因此,初步推测PoJNK2在牙鲆免疫应答方面可能发挥作用。本研究设计了体内迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)侵染实验和体外免疫刺激细胞实验以探究PoJNK2在牙鲆免疫反应中的作用。在迟缓爱德华氏菌体内注射牙鲆成体后,PoJNK2在脾脏、头肾和鳃中有不同程度的表达上调。同时,使用迟缓爱德华氏菌、Poly I:C和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)刺激牙鲆鳃细胞系后,发现PoJNK2在不同时间点表达上调。除此之外,通过细胞转染实验在牙鲆鳃细胞系中过表达PoJNK2,发现其对下游炎症细胞因子的表达及激活蛋白Activator protein-1 (AP-1)的转录活性具有显著的上调作用,进一步阐明了PoJNK2在调节牙鲆免疫应答方面的作用。
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关 键 词: | 牙鲆 JNK2 迟缓爱德华氏菌 先天免疫 |
收稿时间: | 2019/3/27 0:00:00 |
修稿时间: | 2019/4/25 0:00:00 |
Expression Analysis and Functional Characterization of JNK2 in Japanese Flounder (Paralichthys olivaceus) |
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Authors: | SI Yu WANG Xuangang WANG Mengy WANG Xintong YU Haiyang ZHANG Quanqi WANG Zhigang |
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Institution: | Key Laboratory of Marine Genetics and Breeding, Ministry of Education, College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003 |
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Abstract: | |
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Keywords: | Japanese flounder JNK2 Edwardsiella tarda Innate immunity |
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