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| 对虾肝胰腺细小病毒滚环扩增检测方法的建立 | |
| 作者姓名： | 王勤涛 张庆利 杨昊霖 刘天齐 刘 笋 杨 冰 黄 倢 |
| 作者单位： | 农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;上海海洋大学水产与生命学院; |
| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项经费(201103034);现代农业产业技术体系(CARS-47);中国水产科学研究院基本科研业务费(2012A05)共同资助 |
| 摘 要： | 根据对虾肝胰腺细小病毒(HPV)保守基因序列,设计特异性的锁式探针及其扩增引物,优化反应条件,建立了肝胰腺细小病毒超分支滚环扩增检测方法。实验中采用一步法连接,探针在Taq DNA连接酶作用下,58℃连接40 min、62℃扩增30 min便可以扩增出明显条带。反应特异性验证实验表明,该体系能够特异性地检测出HPV,而不与供试的其他对虾病原发生交叉反应;灵敏度分析结果显示该方法的检测极限为105 copies/μl,与PCR检测方法相比,一步法连接的滚环扩增的灵敏度低两个数量级。该方法反应过程中温度变化次数少,基本都在等温条件下进行,不需要PCR仪,可发展成为在简便实验条件下使用的简易检测方法。 |
| 关 键 词： | 对虾 肝胰腺细小病毒 检测 滚环扩增 |
| 收稿时间： | 2013/4/28 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2013/6/19 0:00:00 |
Development and Evaluation of Rolling Circle Amplification Assay for the Detection of the Hepatopancreatic Parvovirus |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Penaeid shrimp HPV Detection RCA |
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