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| 草鱼呼肠孤病毒Taq Man real-time PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 周勇,曾令兵,范玉顶,徐进,马杰,罗晓松,肖艺.草鱼呼肠孤病毒Taq Man real-time PCR检测方法的建立[J].水产学报,2011,35(5):774-779. |
| 作者姓名： | 周勇 曾令兵 范玉顶 徐进 马杰 罗晓松 肖艺 |
| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北荆州,434000 2. 中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北荆州434000;华中农业大学水产学院,湖北武汉430071 3. 华中农业大学水产学院,湖北武汉,430071 |
| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系建设专项资金资助(nycytx-49-16);农业部公益性行业科研专项(200803013) |
| 摘 要： | 利用RT-PCR技术扩增出草鱼呼肠孤病毒(GCRV)VP6蛋白编码区长度为1 250 bp的片段,克隆到pEGFP-N1载体上,构建重组质粒pEGFP-N1-VP6。经PCR鉴定确认正确后,以10倍梯度稀释pEGFP-N1-VP6重组质粒,作为标准模板进行TaqMan real-time PCR扩增,制作标准曲线,建立了草鱼呼肠孤病毒的荧光定量PCR检测方法。检测结果显示,标准曲线的相关系数(R2)达到0.998 09,斜率为-3.373;对初始模板定量检测的范围为1×101～1×106 copies/μL;特异性试验结果表明,该方法可特异性地检测出草鱼呼肠孤病毒,而对鲤春病毒血症病毒(SVCV)、传染性造血器官坏死症病毒(IHNV)无检测信号。本研究建立的草鱼呼肠孤病毒Taq Man real-time PCR方法灵敏度高、特异性强,可进行定量分析,对草鱼出血病快速诊断与病毒病原定量检测有重要意义。 |
| 关 键 词： | 草鱼呼肠孤病毒 VP6蛋白编码基因 Taq Man real-time PCR 检测 |
| 收稿时间： | 2011/1/23 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2/8/2011 11:00:25 AM |
Establishment of a Taq Man real-time PCR assay for detecting the grass carp reovirus |
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| ZHOU Yong,ZENG Ling-bing,FAN Yu-ding,XU Jin,MA Jie,LUO Xiao-song and XIAO Yi.Establishment of a Taq Man real-time PCR assay for detecting the grass carp reovirus[J].Journal of Fisheries of China,2011,35(5):774-779. | |
| Authors: | ZHOU Yong ZENG Ling-bing FAN Yu-ding XU Jin MA Jie LUO Xiao-song and XIAO Yi |
| Institution: | Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences,Yangtze River Fisheries Research Institute, CAFS,Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences,Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences,College of Fisheries, Huazhong Agricultural University,Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences,Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences |
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| Keywords: | |
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