| 半滑舌鳎创伤弧菌分离鉴定及其荧光定量PCR方法的建立 |
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| 引用本文： | 胡秀彩,王英杰,吕爱军,孙敬锋,王庆奎,廉正义,刘小雪,宋亚娇.半滑舌鳎创伤弧菌分离鉴定及其荧光定量PCR方法的建立[J].水产学报,2019,43(5):1359-1368. |
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| 作者姓名： | 胡秀彩 王英杰 吕爱军 孙敬锋 王庆奎 廉正义 刘小雪 宋亚娇 |
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| 作者单位： | 天津农学院水产学院, 天津市水产生态及养殖重点实验室, 天津 300384,天津农学院水产学院, 天津市水产生态及养殖重点实验室, 天津 300384,天津农学院水产学院, 天津市水产生态及养殖重点实验室, 天津 300384,天津农学院水产学院, 天津市水产生态及养殖重点实验室, 天津 300384,天津农学院水产学院, 天津市水产生态及养殖重点实验室, 天津 300384,天津农学院水产学院, 天津市水产生态及养殖重点实验室, 天津 300384,天津农学院水产学院, 天津市水产生态及养殖重点实验室, 天津 300384,河南师范大学水产学院, 河南 新乡 453007 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31272692）；天津市自然科学基金（18JCYBJC29900，16JCZDJC33500）；天津市水产产业技术体系创新团队（ITTFRS2017009，ITTFRS2019049）；天津市水产生态及养殖重点实验室开放基金（TJAE201803）；天津农学院综投平台项目（J01009030638） |
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| 摘 要： | 为确定患病半滑舌鳎的病原,从其体内分离到3株革兰氏阴性菌,将其分别命名为ST-1、ST-3和ST-6,进行细菌理化特性、药敏试验、16S rDNA测序以及组织病理学观察等方面的研究,并建立了外膜蛋白(OMP)基因的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。结果显示,3株分离菌株的理化特性符合创伤弧菌特征,16S rDNA与创伤弧菌标准菌株ATCC29307序列相似性达99%以上,系统发育树分析显示,3株分离株与创伤弧菌自然聚为一支,最终鉴定为创伤弧菌;药敏试验显示,3株菌对头孢克肟、头孢哌酮、链霉素、亚胺培南和氟苯尼考等药物高度敏感。人工回归感染试验表明,分离株具有致病性,且半滑舌鳎、斑马鱼的临床症状与自然患病鱼症状相似;组织病理学观察显示,鳃丝上皮细胞增生,鳃小片肿胀黏连、颗粒细胞和黏液细胞增多,肝脏中央静脉淤血,肾脏出血、坏死,肠道黏膜固有层萎缩、黏液细胞增多等。进一步建立OMP基因的荧光定量PCR方法,结果显示,标准曲线的相关系数为0.995,检测下限为1.88×10~2 CFU/mL。以上结果可为半滑舌鳎弧菌病的致病机理、分子诊断和防治提供科学参考。
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| 关 键 词： | 半滑舌鳎 创伤弧菌 组织病理 荧光定量PCR |
| 收稿时间： | 2018/10/24 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2019/2/15 0:00:00 |
Isolation and identification of Vibrio vulnificus from Cynoglossus semilaevis and establishment of fluorescence quantitative PCR technique |
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| HU Xiucai,WANG Yingjie,L&#; Aijun,SUN Jingfeng,WANG Qingkui,LIAN Zhengyi,LIU Xiaoxue and SONG Yajiao.Isolation and identification of Vibrio vulnificus from Cynoglossus semilaevis and establishment of fluorescence quantitative PCR technique[J].Journal of Fisheries of China,2019,43(5):1359-1368. |
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| Authors: | HU Xiucai WANG Yingjie L&#; Aijun SUN Jingfeng WANG Qingkui LIAN Zhengyi LIU Xiaoxue and SONG Yajiao |
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| Institution: | Tianjin Key Lab of Aqua-Ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China,Tianjin Key Lab of Aqua-Ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China,Tianjin Key Lab of Aqua-Ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China,Tianjin Key Lab of Aqua-Ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China,Tianjin Key Lab of Aqua-Ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China,Tianjin Key Lab of Aqua-Ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China,Tianjin Key Lab of Aqua-Ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China and College of Fisheries, Henan Normal University, Xinxiang 453007, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cynoglossus semilaevis Vibrio vulnificus histopathology fluorescence quantitative PCR |
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