团头鲂tf和tfr1a基因启动子克隆及转录调控分析 |
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引用本文: | 王济秀,张锋,王卫民,刘红.团头鲂tf和tfr1a基因启动子克隆及转录调控分析[J].水产学报,2020,44(4):528-538. |
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作者姓名: | 王济秀 张锋 王卫民 刘红 |
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作者单位: | 华中农业大学水产学院,农业农村部淡水生物繁育重点实验室,湖北武汉 430070 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31572613);湖北省协同创新中心建设专项资金(2016ZXPY04) |
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摘 要: | 为探索鱼类转铁蛋白基因tf和转铁蛋白受体基因tfr1a的转录调控机制,本实验以团头鲂为研究对象,在其全基因组数据库中获取tf和tfr1a基因序列,对2个基因候选启动子区转录因子结合位点及CpG岛进行预测,通过PCR方法克隆得到tf和tfr1a基因近端启动子区不同长度片段,连接至pGL3-Basic/pEGFP-1载体,瞬时转染入Hela细胞,并采用双荧光素酶报告基因检测系统进行检测。结果发现,团头鲂tf基因启动子区无CpG岛位点,而tfr1a基因启动子区有2个CpG岛位点。成功构建9个tf和10个tfr1a不同长度启动子片段的重组质粒,经双荧光素酶报告基因系统检测发现,tf启动子核心区域为-268^+56 bp,且-1 308^-1 102 bp片段可能存在正调控该基因表达的转录因子结合位点;tfr1a启动子核心区域为-224^+48 bp,且+48^+92 bp可能存在抑制该基因转录的负调控元件,而-1 229^-1 219 bp区域可能存在促进tfr1a基因表达的正调控转录因子结合位点。
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关 键 词: | 团头鲂 tf基因 tfr1a基因 启动子 转录调控 |
收稿时间: | 2019/3/25 0:00:00 |
修稿时间: | 2019/6/2 0:00:00 |
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