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巴夫杜氏藻1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基基因的克隆和分析
引用本文:尚常花,朱顺妮,袁振宏,吕鹏梅,王忠铭.巴夫杜氏藻1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基基因的克隆和分析[J].水产学报,2011,35(5):668-674.
作者姓名:尚常花  朱顺妮  袁振宏  吕鹏梅  王忠铭
作者单位:中国科学院广州能源研究所,可再生能源与天然气水合物重点实验室,广东广州510640
基金项目:广东省中国科学院全面战略合作项目(2010A090100010);科技部“十二五”支撑计划(2011BAD14B03);中国科学院可再生能源与天然气水合物重点实验室基金(y107j6)
摘    要:1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)是光合作用中的一个关键酶,其小亚基rbcS具有调控羧化反应催化效率和影响该酶对二氧化碳/氧气底物特异性的功能。从巴夫杜氏藻中克隆rbcS基因及其5′-上游序列,并对基因及5′-上游序列进行了分析。根据已知rbcS基因保守核苷酸序列设计引物,分别克隆到1 841 bp的DNA和380 bp的cDNA序列。以此为基础,使用染色体步移(Genome walking)和cDNA 末端快速扩增(RACE)技术,获得了799 bp的5′端DNA序列和500 bp的3′端cDNA序列。序列分析发现,巴夫杜氏藻rbcS DNA全长为2 031 bp(不包括476 bp 5′-上游序列),cDNA全长包括570 bp开放读码框(GenBank登录号:HQ315783)和294 bp 3′端非翻译区。5′-上游序列区域存在一系列预测的顺式作用元件。该研究旨在为后继的rbcS 基因的功能和表达研究、Rubisco的遗传改造奠定基础。同时,rbcS启动子因其可驱动基因高效表达而引起广泛关注,因此获得的rbcS 5′-上游序列经验证和优化后,可用于在嗜盐微藻中驱动转基因的高效表达以及完善微藻转化系统。

关 键 词:巴夫杜氏藻    基因克隆    5′-上游序列分析    rbcS    1  5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶
收稿时间:2010/11/19 0:00:00
修稿时间:2011/2/25 0:00:00

Cloning and characterization of a gene encoding small subunit of ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase from Dunaliella parva
SHANG Chang-hu,ZHU Shun-ni,YUAN Zhen-hong,LV Peng-mei and WANG Zhong-ming.Cloning and characterization of a gene encoding small subunit of ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase from Dunaliella parva[J].Journal of Fisheries of China,2011,35(5):668-674.
Authors:SHANG Chang-hu  ZHU Shun-ni  YUAN Zhen-hong  LV Peng-mei and WANG Zhong-ming
Institution:Guangzhou Institute of Energy Conversion, Chinese Academy of Sciences
Abstract:
Keywords:Dunaliella parva  gene cloning  promoter analysis  rbcS  Rubisco
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