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黄颡鱼脑P-450芳香化酶基因的克隆和组织表达
引用本文:徐跑.黄颡鱼脑P-450芳香化酶基因的克隆和组织表达[J].水产学报,2005,29(5):591-598.
作者姓名:徐跑
作者单位:1. 南京农业大学无锡渔业学院,江苏,无锡,214081;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,江苏,无锡,214081
2. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,江苏,无锡,214081
基金项目:国家重点基础研究“973”规划项目(2004CB117401);无锡市自然科学基金(CK03001)
摘    要:P-450芳香化酶(P450arom)是催化雄激素生物合成雌激素的关键酶。本文采用RT-PCR和RACE法,首次分离和克隆了黄颡鱼脑P450芳香酶基因HP450aromB,并使用荧光实时定量RT-PCR对其组织表达进行了研究。结果表明HP450aromB cDNA全长2080bp(不包括poly(A)),5′端非翻译区有25bp,3′端555bp(不包含poly(A)),阅读框(open reading frame,ORF)1500bp,编码500个氨基酸,推测的蛋白质分子量为56kDa。同源性分析显示,HP450aromB的氨基酸序列与其它鱼脑P450arom具有70%以上的同源性,与其它鱼卵巢P450arom为60%左右同源,与人胚盘和鸡卵巢P450arom则为50%左右同源;但芳香化酶高保守区包括Ⅰ-螺旋区,芳香化酶特异保守区Ⅱ及血红系结合区Ⅲ和其它鱼芳香化酶相比同源性分别为83%~96%,78%~86%和85%~100%。系统发育分析表明HP450aromB与鱼类脑P450arom属于同一分支的,并且也显示了黄颡鱼和鲶鱼分类地位最近,这和传统的分类一致。实时定量RT-PCR研究显示,HP460arom B在前脑,下丘脑,垂体、卵巢、精巢均有表达,在肝脏没表达,表达量脑部高于性腺,但雌雄鱼脑部HP450aromB的表达总量没显著差异。

关 键 词:黄颡鱼  P450芳香化酶  cDNA末端快速扩增法  系统发育  组织表达
文章编号:1000-0615(2005)05-0591-08
收稿时间:2005-02-17
修稿时间:2005年2月17日

Molecular cloning of neural P450arom and its expression in Pelteobagrus fulvidraco
XU Pao.Molecular cloning of neural P450arom and its expression in Pelteobagrus fulvidraco[J].Journal of Fisheries of China,2005,29(5):591-598.
Authors:XU Pao
Institution:1. Wuxi Fisheries College, Nanjing Agricultural University, Wuxi 214081, China ; 2. Freshwater Fisheries Research Center, Chinese Academy of Fishery Sciences, Wuxi 214081, China
Abstract:
Keywords:Pelteobagrus fulvidraco  P450 aromatase  rapid amplification of cDNA ends(RACE)  phylogenesis  expression in tissues
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