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用免疫蛋白质组学方法筛选哈氏弧菌免疫反应蛋白
引用本文:李岩,庞欢瑛,鲁义善,吴灶和,简纪常.用免疫蛋白质组学方法筛选哈氏弧菌免疫反应蛋白[J].水产学报,2010,34(4):635-642.
作者姓名:李岩  庞欢瑛  鲁义善  吴灶和  简纪常
作者单位:1. 广东海洋大学水产学院,广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东,湛江,524025;广东海洋大学水产学院,广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室,广东,湛江,524025;广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025
2. 广东海洋大学水产学院,广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东,湛江,524025;广东海洋大学水产学院,广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室,广东,湛江,524025;广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025;中国科学院南海海洋研究所,广东,广州,510301;中国科学院研究生院,北京,100049
基金项目:国家自然科学基金项目(30972271); 广东省科技厅国际合作项目(2009B050700040)
摘    要:用免疫蛋白质组学的研究方法鉴定了哈氏弧菌的免疫反应蛋白。将哈氏弧菌接种于TSB培养基28℃培养18h,利用裂解液裂解细菌,提取全菌可溶性蛋白,一向电泳采用7cmpH4~7的胶条进行等电聚焦,二向用12.5%的SDS-PAGE胶分离蛋白质,考马斯亮蓝染色,获得双向电泳图谱,再结合免疫转印技术检测免疫反应的蛋白质,利用ImageMaster 2D Platinum进行配对分析得到15个非特异性的免疫反应性蛋白点,30个特异性的免疫反应性蛋白点。经过鉴定得到13种非特异性的免疫反应性蛋白质,这其中有2对蛋白在胶上的位置不同,但鉴定为同一种蛋白;同时得到28种特异性的免疫反应性蛋白质,有一个蛋白点没有在数据库中查找到相对应的蛋白质,还有1对蛋白在胶上的位置不同,但鉴定为同一种蛋白。将特异性免疫反应蛋白鉴定结果与非特异性比较发现有1对蛋白鉴定为同一种蛋白;另外,No.17和No.19是F0F1 ATP synthase的两个亚基。特异性免疫反应蛋白鉴定结果中有6个蛋白质是已知的其他细菌的具有免疫反应的蛋白,分别为OmpN,OmpW,OmpU,alanine dehydrogenase,Elongation factor...

关 键 词:哈氏弧菌  免疫蛋白质组学  全菌可溶性蛋白  双向电泳  
收稿时间:2009/11/2 0:00:00
修稿时间:2010/1/12 0:00:00

Identification for immuno reactive proteins of Vibrio harveyi by two dimensional electrophoresis method
PANG Huanying,LU Yishan,WU Zaohe and JIAN Jichang.Identification for immuno reactive proteins of Vibrio harveyi by two dimensional electrophoresis method[J].Journal of Fisheries of China,2010,34(4):635-642.
Authors:PANG Huanying  LU Yishan  WU Zaohe and JIAN Jichang
Institution:LI Yan1,2,3,PANG Huan-ying1,4,5,LU Yi-shan1,WU Zao-he1,JIAN Ji-chang1,3(1.Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology , Epidemiology for Aquatic Economic Animals,College of Fisheries,Guangdong Ocean University,Zhanjiang 524025,China,2.Guangdong Key Laboratory of Control for Diseases of Aquatic Economic Animals,3.College of Fisheries,4.South China Sea Institut...
Abstract:Vibrio harveyi is one of the most serious marine pathogen that can infect a number of aquaculture species.It has caused severe losses to aquaculture industries worldwide.Attempts to control the infection are hampered by lack of effective vaccines and rapid diagnostic kits,the formulation of which could be facilitated by the identification of immunogenic proteins.In this study,an immunoproteome-based approach was developed to identify candidate antigens of Vibrio harveyi for vaccine development.A 2-DE map ha...
Keywords:Vibrio harveyi  immunogenic  total soluble proteins  two-dimensional electrophoresis  
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