尼罗罗非鱼Foxp1a/b的cDNA克隆及表达模式研究

为探讨低等脊椎动物Foxp1与免疫细胞活化及机体雌激素水平的相关性，本研究首次分离克隆了尼罗罗非鱼 (Oreochromis niloticus) Foxp1的开放阅读框序列，并通过real-time PCR对其mRNA表达水平进行检测。结果显示，尼罗罗非鱼具有两种不同基因编码的Foxp1分子，分别命名为OnFoxp1a与OnFoxp1b；OnFoxp1a为1710 bp，由15个外显子编码569个氨基酸，OnFoxp1b为2040 bp，由16个外显子编码679个氨基酸；OnFoxp1a/b均含有Foxp亚家族的特征性结构，即锌指结构、亮氨酸拉链样结构和叉状螺旋结构；与OnFoxp1a相比，OnFoxp1b与高等脊椎动物Foxp1具有更近的亲缘关系。Real-time PCR检测结果显示，OnFoxp1a/b几乎在所有组织中均有表达，OnFoxp1a在精巢中有高水平表达， OnFoxp1b在心脏中有高水平表达，同时OnFoxp1b在免疫相关组织如鳃、脾脏、肾脏、肠等均有中等水平表达；淋巴细胞多克隆刺激剂PHA、PMA、LPS刺激尼罗罗非鱼外周血单个核细胞（PBMC），结果显示，50 μg/mL PHA和50 ng/mL PMA分别刺激6、12、24 h均显著增强OnFoxp1b的表达 (p＜0.05)，20 μg/mL LPS刺激后，OnFoxp1b的表达出现先降低后升高的趋势 (p＜0.05)；而OnFoxp1a的表达除50 μg/mL PHA 刺激24 h后有所升高，其余均无显著变化；雌激素处理6月龄雄性尼罗罗非鱼48 h，OnFoxp1a/b在肠、肾脏中的表达显著上调 (p＜0.05)，而脾脏中无显著变化 (p>0.05)。综上所述，低等脊椎动物硬骨鱼类两种不同基因编码的Foxp1a/b均为哺乳动物Foxp1的同源分子，但其序列、结构特征、表达模式迥异，提示其功能发生歧化；同时两者的表达与淋巴细胞活化及机体雌激素水平密切相关。

Molecular cloning and expression analysis of Foxp1a/b from Nile tilapia(Oreochromis niloticus)