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团头鲂IL-12表达及功能的初步研究
引用本文:武佳琪,王济秀,刘红.团头鲂IL-12表达及功能的初步研究[J].水产学报,2022,46(11):2028-2037.
作者姓名:武佳琪  王济秀  刘红
作者单位:华中农业大学水产学院,华中农业大学水产学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31972781),现代农业产业技术体系国家大宗淡水鱼产业技术体系建设专项(CARS-46-08)
摘    要:白细胞介素-12(IL-12)是一种连接先天性和适应性免疫系统的重要细胞因子,在免疫反应和炎症反应中均发挥着重要作用。本实验以团头鲂为研究对象,克隆了团头鲂IL-12的4个亚基IL-12A、IL-12Ba、IL-12Bb和IL-12Bc的开放阅读框(ORF)序列,长度分别为588、993、939和837 bp。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果表明,团头鲂IL-12各亚基在检测的10个不同的成鱼健康组织中都有表达,但是在不同组织中的表达模式不同;腹腔注射嗜水气单胞菌后,团头鲂IL-12各亚基在免疫相关组织中显著差异表达;脂多糖(LPS)刺激分离的团头鲂头肾淋巴细胞后,4个IL-12亚基均被快速诱导表达。进一步通过大肠杆菌原核表达系统和变性复性方法得到团头鲂IL-12Bb、IL-12Bc重组蛋白并刺激分离的头肾淋巴细胞,显著上调TNF-α、IL-1β、IFN-γ的表达,表明获得的重组蛋白具有生物学活性。最后对获得的蛋白进行抑菌活性检测,结果表明重组IL-12Bb、IL-12Bc单体蛋白对嗜水气单胞菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有明显的抑制作用。综上,本研究结果表明,团头鲂IL-12在调节免疫应答的过程中发挥着重要作用。

关 键 词:团头鲂  白介素12  细菌刺激  基因表达  原核表达  抑菌活性
收稿时间:2021/4/13 0:00:00
修稿时间:2021/6/8 0:00:00

Preliminary study on the expression and function of IL-12 in Megalobrama amblycephala
WU Jiaqi,WANG Jixiu,LIU Hong.Preliminary study on the expression and function of IL-12 in Megalobrama amblycephala[J].Journal of Fisheries of China,2022,46(11):2028-2037.
Authors:WU Jiaqi  WANG Jixiu  LIU Hong
Institution:HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY College of Fisheries,HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY College of Fisheries
Abstract:
Keywords:Megalobrama amblycephala  Interleukin-12  Bacterial stimulation  Gene expression  Prokaryotic expression  Antibacterial activity
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