| 基于toxR基因的轮虫弧菌荧光定量微流控快速检测技术的建立 |
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| 引用本文： | 陈京,永翔,张正,王印庚,廖梅杰,荣小军.基于toxR基因的轮虫弧菌荧光定量微流控快速检测技术的建立[J].水产学报,2020,44(12):2066-2075. |
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| 作者姓名： | 陈京 永翔 张正 王印庚 廖梅杰 荣小军 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学水产与生命学院,上海 201306;中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛 266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛 266071;中国水产科学研究院黄海水产研究所,山东青岛 266071;青岛海洋科学与技术试点国家实验室,海洋渔业科学与食品产出过程功能实验室,山东青岛 266237 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2019YFD0900104); 山东省重大科技创新工程项目(2018YFJH0730) |
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| 摘 要： | 以轮虫弧菌的单拷贝基因toxR基因的高保守区域为目的片段，设计特异性引物，构建重组质粒标准品，建立针对该菌的荧光定量PCR检测方法。以此为基础，实验选用UF-150 Genechecker微流控荧光定量PCR仪，通过优化反应体系和反应条件，建立了轮虫弧菌的微流控荧光定量PCR检测方法。结果显示，该方法能特异性扩增toxR基因目的片段，对轮虫弧菌纯培养物检测下限为1.34×100 拷贝/μL。在人工感染样品中的应用结果显示，对鱼体组织中轮虫弧菌的检测下限为1.34×103 CFU/g，检测结果可以目视判读，检测时间缩短至42 min以内。研究表明，该检测方法具有特异性强、敏感度高、场地要求低等突出优势，适于开发水产病原实用性的现场快速检测技术。
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| 关 键 词： | 轮虫弧菌 toxR基因 实时荧光定量PCR 微流控快速检测 |
| 收稿时间： | 2019/12/1 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2020/1/2 0:00:00 |
Establishment of a fluorescence quantitative microfluidic rapid detection technique for Vibrio rotiferianus based on toxR gene |
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| CHEN Jing,YU Yongxiang,ZHANG Zheng,WANG Yingeng,LIAO Meijie,RONG Xiaojun.Establishment of a fluorescence quantitative microfluidic rapid detection technique for Vibrio rotiferianus based on toxR gene[J].Journal of Fisheries of China,2020,44(12):2066-2075. |
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| Authors: | CHEN Jing YU Yongxiang ZHANG Zheng WANG Yingeng LIAO Meijie RONG Xiaojun |
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| Institution: | College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China;Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China;Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Pilot National Laboratory for Marine Science and Technology (Qingdao), Qingdao 266237, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Vibrio rotiferianus toxR gene quantitative real-time PCR microfluidic rapid detection |
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