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三疣梭子蟹EcR基因的克隆及表达分析
引用本文:崔晓雨,朱冬发,汤 洁,谢 熙,邱锡尔.三疣梭子蟹EcR基因的克隆及表达分析[J].水产学报,2013,37(11):1645-1654.
作者姓名:崔晓雨  朱冬发  汤 洁  谢 熙  邱锡尔
作者单位:宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院
基金项目:国家自然科学基金项目(41376152,40976098);浙江省自然科学基金项目(LY13C190006);宁波市自然科学基金项目(2012A610137)
摘    要:为研究蜕皮激素受体(EcR)在甲壳动物生长和生殖过程中的作用,采用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA 末端快速扩增(RACE)技术,克隆了三疣梭子蟹蜕皮激素受体 (PtEcR)基因全长cDNA序列(GenBank登录号:KC354381),运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,分析该基因在不同组织、蜕皮时期和二次卵巢发育阶段的表达特 征。结果表明,PtEcR cDNA全长2 231 bp,包含1 269 bp ORF,编码422个氨基酸;推导的PtEcR氨基酸序列与已公布的其他甲壳动物EcR进行比对,发现一致性 达67%~97%;系统进化树分析PtEcR与其它甲壳动物EcR聚为一支,而昆虫EcR聚为另一支。PtEcR在检测的三疣梭子蟹10个组织中均有表达,其中在Y-器(YO)表达量最高。在蜕皮周期中,自蜕皮后期至蜕皮前期D2亚期PtEcR在YO中的表达量一直较低;至D3亚期和D4亚期,PtEcR表达量显著升高,这与血 淋巴中20-羟基蜕皮酮(20E)浓度在D3/D4亚期显著升高相协同,表明PtEcR在三疣梭子蟹蜕皮过程中起着重要的作用。二次卵巢发育阶段,PtEcR在YO和肝胰 腺(Hp)中的表达量自Ⅱ期逐渐升高至Ⅳ期达到最高;卵巢(Ov)中,则在Ⅰ、Ⅲ期较低,Ⅱ、Ⅳ期较高,表明PtEcR可能参与卵巢发育和卵黄发生。

关 键 词:三疣梭子蟹    蜕皮激素受体    蜕皮周期    二次卵巢发育
收稿时间:8/9/2013 12:00:00 AM
修稿时间:2013/9/22 0:00:00

Cloning and expression analysis of ecdysteroid receptor (EcR)in Portunus trituberculatus
CUI Xiaoyu,ZHU Dongf,TANG Jie,XIE Xi and QIU Xier.Cloning and expression analysis of ecdysteroid receptor (EcR)in Portunus trituberculatus[J].Journal of Fisheries of China,2013,37(11):1645-1654.
Authors:CUI Xiaoyu  ZHU Dongf  TANG Jie  XIE Xi and QIU Xier
Abstract:
Keywords:Portunus trituberculatus  ecdysteroid receptor(EcR)  molting stage  second ovarian development
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