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三疣梭子蟹CYP302a1基因克隆及其表达分析
引用本文:柳志业,朱冬发,谢熙,邱锡尔,周彦琦,沈锡权.三疣梭子蟹CYP302a1基因克隆及其表达分析[J].水产学报,2015,39(5):628-637.
作者姓名:柳志业  朱冬发  谢熙  邱锡尔  周彦琦  沈锡权
作者单位:宁波大学海洋学院,浙江宁波,315211
基金项目:国家自然科学基金(41376152,40976098);浙江省自然科学基金(LY13C190006)
摘    要:细胞色素P450(CYP)302a1是昆虫蜕皮激素合成通路中的关键酶,为了研究其在三疣梭子蟹蜕皮过程中的调控作用,实验采用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术,克隆得到了三疣梭子蟹CYP302a1全长cDNA序列(GenBank登录号:KM596851).该序列全长为3 171 bp,包含一个长度为1 626 bp的开放阅读框,编码541个氨基酸;序列分析显示该氨基酸含helix-C、helix-K、helix-I、PERF及heme-binding共5个P450特征保守区域;系统进化树分析发现三疣梭子蟹CYP302a1与日本剑水蚤CYP302a1聚为一小支,再与其他物种CYP302a1聚为一支.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析了CYP302a1在不同组织和蜕皮过程中的表达水平变化.结果显示,CYP302a1的表达量在Y器中最高,而在其他组织中均极低(P<0.05);蜕皮过程中,CYP302a1在蜕皮后期(A、B期)表达量最低,从蜕皮间期(C期)开始上升,至蜕皮前期的D1亚期达到最大值,随后下降.结果表明CYP302a1在三疣梭子蟹蜕皮调控中可能起着重要作用.

关 键 词:三疣梭子蟹  CYP302a1  蜕皮周期  基因克隆  表达水平
收稿时间:2014/12/4 0:00:00
修稿时间:3/2/2015 12:00:00 AM

Molecular cloning and expression analysis of CYP302a1 from Portunus trituberculatus
LIU Zhiye,ZHU Dongf,XIE Xi,QIU Xier,ZHOU Yanqi and SHEN Xiquan.Molecular cloning and expression analysis of CYP302a1 from Portunus trituberculatus[J].Journal of Fisheries of China,2015,39(5):628-637.
Authors:LIU Zhiye  ZHU Dongf  XIE Xi  QIU Xier  ZHOU Yanqi and SHEN Xiquan
Institution:School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China,School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China,School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China,School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China,School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China and School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China
Abstract:
Keywords:Portunus trituberculatus  CYP302a1  molting cycle  cloning  gene expression
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