翘嘴红肝脏G6Pase催化亚基的克隆以及摄食和饲料中碳水化合物对其表达的影响

采用RT-PCR和RACE法分离、克隆了翘嘴红G6Pase催化亚基基因全长cDNA，共1900 bp ［不含poly(A)］, 包括49 bp 5′非翻译区，1068 bp阅读框以及含Poly(A)信号AATAAA的778 bp 3′非翻译区［不包括Poly(A)］。阅读框共编码355个氨基酸，分子量为39.89 ku。序列比对分析表明翘嘴红G6Pase与斑马鱼G6Pase的相似性高达95%，与鼠、狗、人G6Pase的相似性为63%，和光滑爪蟾、金头鲷、河豚等G6Pase的相似性分别为69%、55%、76%，并具有G6Pase特有的3个保守基序。为了研究摄食以及饲料中碳水化合物对G6Pase的影响，使用实时定量RT-PCR分别测定了饲喂等能但不含碳水化合物和含23.98%碳水化合物的饲料的翘嘴红肝脏G6Pase基因的表达水平，在使用上述饲料饲喂8周后，禁食48 h, 然后测定禁食和摄食后3、6、12、24 h G6Pase mRNA的表达量，结果显示摄食后12 h，两组G6Pase的表达明显增加，说明摄食影响G6Pase基因的表达，禁食和摄食后3～12 h，含糖组G6Pase基因的表达量为无糖组的2～4倍，这表明碳水化合物可以诱导G6Pase mRNA的表达。图5参21 关键词：快速扩增cDNA末端；葡萄糖6磷酸酶；碳水化合物；翘嘴红；实时定量PCR E-mail:gexp@ffrc.cn

Molecular cloning of hepatic glucose-6-phosphatase catalytic subunit from Erythroculter ilishaeformis: response of its expression to refeeding and carbohydrate in diet