| 中国大鲵脑cDNA文库构建及促甲状腺激素β亚基基因cDNA的克隆和序列分析 |
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| 引用本文： | 杨丽萍,杨慧荣,张勇,刘云,黄海,刘晓春,蒙子宁,黄俊海,林浩然.中国大鲵脑cDNA文库构建及促甲状腺激素β亚基基因cDNA的克隆和序列分析[J].水产学报,2008,32(4):507-516. |
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| 作者姓名： | 杨丽萍 杨慧荣 张勇 刘云 黄海 刘晓春 蒙子宁 黄俊海 林浩然 |
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| 作者单位： | 1. 中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室,广东广州,510275
2. 中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室,广东广州,510275;海南大学海洋学院,海南海口,570228 |
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| 基金项目： | 广东省教育部产学研结合项目
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广东省科技计划项目
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中山大学青年教师科研启动基金 |
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| 摘 要： | 以大鲵脑组织为材料,提取总RNA,应用CloneminerTM文库构建技术构建了cDNA文库.经检测,文库初始滴度为5.0×105 cfu·mL-1,重组率为91.70%,插入片断大小在0.35～3.9 kb,平均插入片段大小为0.791 kb,文库扩增后滴度为4.0×109 cfu·mL-1.随机挑选200个阳性克隆测序,经生物信息学分析,发现20个片段与已报道的基因有较高同源性,包括促甲状腺激素基因、生长激素基因及催乳素基因等,其中三个克隆为促甲状腺激素β亚基(TSHβ)基因.序列分析表明,TSHβ cDNA全长序列为705 bp,包含417 bp开放读码框,编码138个氨基酸序列,其中前19个氨基酸为大鲵TSHβ亚基信号肽部分,后接119个氨基酸组成的TSHβ亚基成熟肽.同源性分析显示,大鲵TSHβ亚基与两栖类牛蛙、蟾蜍及爪蟾同一蛋白的同源性分别为53.6%、52.2%和60.3%.采用邻接法和最大简约法对部分脊椎动物TSHβ氨基酸序列构建分子系统树,结果显示有尾目大鲵为两栖动物中较早分化的一支,表明其进化地位较原始.RT-PCR组织分布分析发现,TSHβ基因除垂体有表达外,性腺也有少量表达.
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| 关 键 词： | 中国大鲵 cDNA文库 促甲状腺激素β亚基 组织分布 |
| 收稿时间： | 2007/10/9 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2008/2/25 0:00:00 |
Construction of cDNA library from the brain of Chinese giant salamander Andrias davidianus with cloning and sequence analysis of the cDNA encoding thyroid-stimulating hormone β-subunit |
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| YANG Li-ping,YANG Hui-rong,ZHANG Yong,LIU Yun,HUANG Hai,LIU Xiao-chun,MENG Zi-ning,HUANG Jun-hai,LIN Hao-ran.Construction of cDNA library from the brain of Chinese giant salamander Andrias davidianus with cloning and sequence analysis of the cDNA encoding thyroid-stimulating hormone β-subunit[J].Journal of Fisheries of China,2008,32(4):507-516. |
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| Authors: | YANG Li-ping YANG Hui-rong ZHANG Yong LIU Yun HUANG Hai LIU Xiao-chun MENG Zi-ning HUANG Jun-hai LIN Hao-ran |
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| Institution: | Institute of Aquatic Economic Animals, Sun Yat-Sen University,,,,,,,, |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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