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草鱼呼肠孤病毒VP7基因核酸疫苗的构建及免疫效果
引用本文:徐诗英,刘林,李婧慧,邹勇,倪金俤,杨鸢劼,贡成良,曹广力,薛仁宇,陈辉.草鱼呼肠孤病毒VP7基因核酸疫苗的构建及免疫效果[J].水产学报,2011,35(11):1694-1700.
作者姓名:徐诗英  刘林  李婧慧  邹勇  倪金俤  杨鸢劼  贡成良  曹广力  薛仁宇  陈辉
作者单位:1. 南京师范大学生命科学学院,江苏南京210046;江苏省水生动物疫病预防控制中心,江苏南京210036
2. 苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州,215123
3. 江苏省水生动物疫病预防控制中心,江苏南京,210036
4. 江苏省淡水水产研究所,江苏南京,210017
基金项目:江苏省科技支撑计划项目(BE2009387);江苏省农业科技自主创新资金项目(SCX(11)2165)
摘    要:将草鱼呼肠孤病毒( GCRV)外衣壳蛋白VP7双基因(约0.9 kb)及团头鲂的β-肌动蛋白启动子(约0.56 kp)经扩增并鉴定正确后,克隆至基因转移载体pFastBacTM Dual中,获得重组质粒pFastBac-β-VP71 -VP72,以此研究草鱼免疫实验及免疫效果.重组质粒按10、30、60μg分为3组,同时设30 μg空载体组及对照组.于免疫后第14、21、28、49天通过RT-PCR检测VP7的转录水平、间接凝集反应测定抗体水平及攻毒试验检测免疫保护效果.结果显示,pFastBac-β-VP71 -VP72导入鱼体后,VP7基因在β-肌动蛋白启动子的驱动下持续表达,至第49天仍能检测到目的基因的转录;各免疫组均有抗体产生,抗体效价在免疫后第21天达到最高,攻毒后10、30、60 μg核酸疫苗免疫组死亡率分别为0%、0%、5%,而空载体组和对照组分别为30%和100%,表明pFastBac-β-VP71-VP72作为核酸疫苗对草鱼病毒性出血病有较好的免疫保护效果.研究结果为草鱼呼肠孤病毒核酸疫苗的研发与生产应用奠定了基础.

关 键 词:草鱼呼肠孤病毒  VP7  核酸疫苗  β-肌动蛋白启动子
收稿时间:2011/5/24 0:00:00
修稿时间:9/5/2011 12:00:00 AM

Construction and immune efficacy studies on DNA vaccine with VP7 gene of grass carp reovirus
XU Shi ying,LIU Lin,LI Jing hui,ZOU Yong,NI Jin di,YANG Yuan jie,GONG Cheng liang,CAO Guang li,XUE Ren yu and CHEN Hui.Construction and immune efficacy studies on DNA vaccine with VP7 gene of grass carp reovirus[J].Journal of Fisheries of China,2011,35(11):1694-1700.
Authors:XU Shi ying  LIU Lin  LI Jing hui  ZOU Yong  NI Jin di  YANG Yuan jie  GONG Cheng liang  CAO Guang li  XUE Ren yu and CHEN Hui
Institution:Jiangsu Center for Control and Prevention of Aquatic Animal Infectious Disease
Abstract:
Keywords:
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