| 基于Nrf 2/HO-1启动子筛选抗水生病毒药物的方法 |
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| 引用本文： | 王靖雯,吴苗苗,李莉娟,顾泽茂,袁军法.基于Nrf 2/HO-1启动子筛选抗水生病毒药物的方法[J].水产学报,2024,48(2). |
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| 作者姓名： | 王靖雯 吴苗苗 李莉娟 顾泽茂 袁军法 |
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| 作者单位： | 华中农业大学水产学院,华中农业大学水产学院,华中农业大学水产学院,华中农业大学水产学院,华中农业大学水产学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31872598） |
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| 摘 要： | 为建立基于Nrf2、HO-1启动子活性的抗病毒药物筛选方法,本实验以黑头软口鲦上皮细胞系(FHM)为材料,构建Nrf2、HO-1启动子重组质粒,利用双荧光素酶报告系统检测不同浓度(0、3.125、6.25、12.5、25、50 μg/mL)的白藜芦醇、水飞蓟宾、穿心莲内酯及姜黄素对启动子活性的影响,并利用鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus,SVCV)和蛙虹彩病毒(rana grylio iridovirus,RGV)验证阳性药物的抗病毒效果。结果显示,Nrf2、HO-1启动子序列中存在FOX家族、IRF家族等多种转录因子的结合位点,并分别存在1个和3个与甲基化相关的CpG岛。双荧光素酶报告实验显示,水飞蓟宾、穿心莲内酯及姜黄素可激活Nrf2、HO-1启动子。药物浓度梯度实验表明,6.25 μg/mL的姜黄素和穿心莲内酯可显著上调Nrf2和HO-1的启动子活性。病毒感染后的细胞病变效应、病毒的复制及病毒滴度结果均证明姜黄素和穿心莲内酯可抑制SVCV和RGV的感染。综上,本实验建立的pGL3-Nrf2和pGL3-HO-1启动子报告质粒,可用于抗水生病毒药物的筛选,也为Nrf2、HO-1转录调控机制的研究提供了工具。
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| 关 键 词： | 黑头软口鲦上皮细胞(FHM) Nrf2 HO-1 启动子 转录调控 抗病毒药物筛选 |
| 收稿时间： | 2022/3/18 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2022/6/19 0:00:00 |
A screening method of anti-aquatic viral drugs based on Nrf2/HO-1 promoter |
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| WANG Jingwen,WU Miaomiao,LI Lijuan,GU Zemao and YUAN Junfa.A screening method of anti-aquatic viral drugs based on Nrf2/HO-1 promoter[J].Journal of Fisheries of China,2024,48(2). |
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| Authors: | WANG Jingwen WU Miaomiao LI Lijuan GU Zemao and YUAN Junfa |
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| Institution: | College of Fisheries,Huazhong Agricultural University,College of Fisheries,Huazhong Agricultural University,College of Fisheries,Huazhong Agricultural University,College of Fisheries,Huazhong Agricultural University,College of Fisheries,Huazhong Agricultural University |
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