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大黄鱼C型凝集素受体Clec4e的分子鉴定及凝集特性
引用本文:张鑫洛,王永阳,吴子良,陈新华,张伟妮.大黄鱼C型凝集素受体Clec4e的分子鉴定及凝集特性[J].水产学报,2024,48(2).
作者姓名:张鑫洛  王永阳  吴子良  陈新华  张伟妮
作者单位:福建农林大学 海洋研究院 福建省海洋生物技术重点实验室,福建农林大学 中西兽医结合与动物保健福建省高校重点实验室,福建农林大学 海洋研究院 福建省海洋生物技术重点实验室,福建农林大学 海洋研究院 福建省海洋生物技术重点实验室,福建农林大学 海洋研究院 福建省海洋生物技术重点实验室
基金项目:国家自然科学基金(31802333)
摘    要:C型凝集素受体(C-type lectin receptor,CTLR)是可以特异性结合糖类病原体相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)的模式识别受体(pattern recognition receptors,PPRs),在先天性免疫中发挥着重要作用。为了揭示硬骨鱼CTLR的生物学功能,本研究以从大黄鱼(Larimichthys crocea)转录组数据库中筛选出的一个CTLR基因—C型凝集素结构域家族4成员E基因(C-type lectin domain family 4 member E gene,Clec4e)为研究对象,研究其分子特征、表达分布和凝集特性。结果显示,LcClec4e cDNA全长1546 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)771 bp,编码254个氨基酸。LcClec4e的N端有一个跨膜区,无信号肽,C端含有一个糖识别结构域(carbohydrate recognition domain,CRD),其中含有糖结合位点EPN和WFD以及6个可形成二硫键的保守半胱氨酸。系统发育分析表明,LcClec4e与多种鲈形目鱼类Clec4e具有较近的亲缘关系。荧光定量PCR结果显示,LcClec4e在所检测的10种组织中呈组成型分布,且在肝脏中表达量最高;LcClec4e在来源于大黄鱼头肾组织的原代巨噬细胞、淋巴细胞和粒细胞中均有表达,且在巨噬细胞中表达量最高;经灭活溶藻弧菌刺激后,LcClec4e在3种免疫细胞中的表达均极显著上调。原核表达的重组LcClec4e胞外段(recombinant LcClec4e-extracellular domain,rLcClec4e-ex)具有Ca2+依赖性的凝集活性,可凝集小鼠、家兔的红细胞,以及嗜水气单胞菌、变形假单胞菌、溶藻弧菌和坎氏弧菌等4种水产常见的革兰氏阴性菌。D-葡萄糖、D-果糖、D-甘露糖、D-麦芽糖、α-乳糖和脂多糖均可抑制rLcClec4e-ex对大黄鱼重要病原菌变形假单胞菌的凝集作用,说明LcClec4e可能与变形假单胞菌表面的糖类物质结合。这些研究结果提示,LcClec4e可能作为一种PPR,通过结合病原菌表面的糖类PAMPs来识别病原,参与大黄鱼抗细菌感染的免疫防御。

关 键 词:大黄鱼  C型凝集素受体  Clec4e  红细胞凝集  细菌凝集
收稿时间:2022/1/24 0:00:00
修稿时间:2022/4/22 0:00:00

Molecular identification and agglutination characteristics of C-type lectin receptor Clec4e in large yellow croaker(Larimichthys crocea)
ZHANG Xinluo,WANG Yongyang,WU Ziliang,CHEN Xinhua and ZHANG Weini.Molecular identification and agglutination characteristics of C-type lectin receptor Clec4e in large yellow croaker(Larimichthys crocea)[J].Journal of Fisheries of China,2024,48(2).
Authors:ZHANG Xinluo  WANG Yongyang  WU Ziliang  CHEN Xinhua and ZHANG Weini
Institution:Key Laboratory of Marine Biotechnology of Fujian Province,Institute of Oceanology,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou,University Key Laboratory for Integrated Chinese Traditional and Western Veterinary Medicine and Animal Healthcare in Fujian Province,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou,Key Laboratory of Marine Biotechnology of Fujian Province,Institute of Oceanology,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou,Key Laboratory of Marine Biotechnology of Fujian Province,Institute of Oceanology,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou,Key Laboratory of Marine Biotechnology of Fujian Province,Institute of Oceanology,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou
Abstract:
Keywords:Larimichthys crocea  C-type lectin receptor  Clec4e  hemagglutination  bacterial agglutination
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