| 三倍体湘云鲫2号IFNa3基因的克隆及功能初探 |
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| 引用本文： | 吴慧,侯利芬,黄嘉仪,冯浩.三倍体湘云鲫2号IFNa3基因的克隆及功能初探[J].水产学报,2021,45(9):1478-1490. |
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| 作者姓名： | 吴慧 侯利芬 黄嘉仪 冯浩 |
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| 作者单位： | 湖南师范大学,湖南师范大学,湖南师范大学,湖南师范大学 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31920103016, 32002415）,省自然科学基金（2019RS1038），湖南省现代农业（水产）产业项目，湖南省学位与研究生教育改革项目（2019JGYB095），湖南省研究生优秀教学团队项目 |
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| 摘 要： | 三倍体湘云鲫2号具有不育、生长快、抗病抗逆性强等优良特性。为探究其抗病优势分子机制,实验克隆及鉴定了三倍体湘云鲫2号干扰素a3(3nIFNa3)。3nIFNa3的CDS由552个核苷酸组成,编码184个氨基酸。经预测,3nIFNa3 N端23位氨基酸为信号肽;3nIFNa3成熟肽中存在2个半胱氨酸残基并参与形成二硫键,表明其隶属于Ⅰ型一组干扰素。实时荧光定量PCR (qPCR)结果显示,宿主细胞经poly I∶C刺激后8 h、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)或鲤春病毒血症病毒(SVCV)感染后48 h,3nIFNa3的转录水平达到最高。免疫印迹和免疫荧光结果显示,3nIFNa3为分泌型蛋白,分子量约为21.8 ku,其在出胞前主要分布于细胞质中。进一步研究发现,在宿主细胞中过表达3nIFNa3或含3nIFNa3的上清培养基孵育宿主细胞均能诱导内源ISG基因转录水平的显著提高。其中,3nSTAT1及3nVIPERIN在含3nIFNa3的上清培养基孵育后2 h转录水平达到最高,3nPKR则在4 h表达水平最高。此外,病毒滴度测定及结晶紫染色实验表明,EPC细胞经3nIFNa3孵育或过表达3nIFNa3后,其抗GCRV和SVCV的能力均显著增强。研究表明,3nIFNa3为可分泌的细胞因子,在宿主抗病毒天然免疫反应中发挥作用。
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| 关 键 词： | 三倍体湘云鲫2号 干扰素 SVCV GCRV 天然免疫 |
| 收稿时间： | 2021/5/13 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2021/8/17 0:00:00 |
Molecular cloning and preliminary functional study of IFNa3 in No.2 of Xiangyun crucian carp |
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| WU Hui,HOU Lifen,HUANG Jiayi,FENG Hao.Molecular cloning and preliminary functional study of IFNa3 in No.2 of Xiangyun crucian carp[J].Journal of Fisheries of China,2021,45(9):1478-1490. |
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| Authors: | WU Hui HOU Lifen HUANG Jiayi FENG Hao |
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| Institution: | Hunan Normal University,Hunan Normal University,Hunan Normal University,Hunan Normal University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | triploid hybrid IFN SVCV GCRV innate immunity |
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