| 一种免疫诱导型鲤启动子的克隆与功能分析 |
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| 引用本文： | 赵紫霞,张研,曹顶臣,孙昭宁,许建,徐鹏.一种免疫诱导型鲤启动子的克隆与功能分析[J].水产学报,2017,41(12):1829-1837. |
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| 作者姓名： | 赵紫霞 张研 曹顶臣 孙昭宁 许建 徐鹏 |
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| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院,农业部水生动物基因组学重点实验室,渔业生物技术北京市重点实验室,北京 100141;2. 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江 哈尔滨,150070;3. 中国水产科学研究院,农业部水生动物基因组学重点实验室,渔业生物技术北京市重点实验室,北京 100141;厦门大学海洋与地球学院,福建 厦门 361102 |
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| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（2015C007）；国家科技支撑计划（2015BAD25B01） |
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| 摘 要： | 为发掘适用于基因工程抗病育种的鱼类启动子,通过实时荧光定量PCR实验对鲤Rab GTP酶(Ras-associated binding-GTPases 1a3,Rab1a3)基因的表达模式进行了分析,证实该基因在鳃、头肾等与机体免疫防御功能密切相关的组织内转录水平较高,且免疫激活后转录显著增强,符合基因工程抗病育种所需的外源免疫基因转录模式。从鲤细菌人工染色体文库中,使用Rab1a3基因特异引物筛选获得包含该基因区域的文库克隆,测序获得该基因完整序列,以及上下游调控序列。通过生物信息学手段,预测到长度为1014 bp的鲤Rab1a3基因启动子序列,该启动子不具有典型的TATA盒或CpG岛特征,存在多个免疫相关转录因子结合位点。在草鱼肾组织细胞系内验证该启动子活性,结果显示,绿色荧光蛋白基因和萤火虫荧光素酶基因都能够在该启动子驱动下表达,证实该片段具有启动子活性,且启动子活性在受到免疫诱导后增强,双荧光素酶报告基因检测结果显示,该启动子活性在免疫刺激后增强至免疫刺激前的8.67倍。研究表明,鲤Rab1a3基因启动子有望被开发成为免疫诱导型的基因工程元件,驱动外源免疫基因在鱼体内适时表达,抵御外界病原感染,同时避免非必要条件下的过度表达形成生长负担。
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| 关 键 词： | 鲤 Rab1a3基因 启动子 免疫诱导 |
| 收稿时间： | 2016/8/26 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/3/30 0:00:00 |
Cloning and functional analysis of an immune-induced promoter in common carp(Cyprinus carpio) |
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| ZHAO Zixi,ZHANG Yan,CAO Dingchen,SUN Zhaoning,XU Jian and XU Peng.Cloning and functional analysis of an immune-induced promoter in common carp(Cyprinus carpio)[J].Journal of Fisheries of China,2017,41(12):1829-1837. |
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| Authors: | ZHAO Zixi ZHANG Yan CAO Dingchen SUN Zhaoning XU Jian and XU Peng |
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| Institution: | Key Laboratory of Aquatic Genomics, Ministry of Agriculture, Beijing Key Laboratory of Fishery Biotechnology, Chinese Academy of Fishery Sciences, Beijing 100141, China,Key Laboratory of Aquatic Genomics, Ministry of Agriculture, Beijing Key Laboratory of Fishery Biotechnology, Chinese Academy of Fishery Sciences, Beijing 100141, China,Heilongjiang River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Harbin 150070, China,Key Laboratory of Aquatic Genomics, Ministry of Agriculture, Beijing Key Laboratory of Fishery Biotechnology, Chinese Academy of Fishery Sciences, Beijing 100141, China,Key Laboratory of Aquatic Genomics, Ministry of Agriculture, Beijing Key Laboratory of Fishery Biotechnology, Chinese Academy of Fishery Sciences, Beijing 100141, China and Key Laboratory of Aquatic Genomics, Ministry of Agriculture, Beijing Key Laboratory of Fishery Biotechnology, Chinese Academy of Fishery Sciences, Beijing 100141, China;College of Ocean and Earth Sciences, Xiamen University, Xiamen 361102, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cyprinus carpio Rab1a3 promoter immune-induced |
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