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斜带石斑鱼甘露糖受体基因的克隆表达及其功能
引用本文:张梦兰,秦真东,卢志杰,赵丽娟,潘淦,林蠡.斜带石斑鱼甘露糖受体基因的克隆表达及其功能[J].水产学报,2021,45(8):1279-1295.
作者姓名:张梦兰  秦真东  卢志杰  赵丽娟  潘淦  林蠡
作者单位:华南师范大学生命科学学院,仲恺农业工程学院动物科技学院,仲恺农业工程学院动物科技学院,仲恺农业工程学院动物科技学院,华南师范大学生命科学学院,仲恺农业工程学院动物科技学院
基金项目:广东省海洋与渔业厅项目,(GDME-2018C006),单聚体壳寡糖的免疫调控及其推广应用,主持,在研,100万,2018/7-2020/7
摘    要:为了研究斜带石斑鱼甘露糖受体(Epinephelus coioides mannose receptor, Ec MR)在抗赤点石斑鱼神经坏死病毒(red-spotted grouper nervous necrosis virus,RGNNV)感染中的免疫功能,实验成功克隆与表达了EcMR。结果显示,EcMR cDNA全长4 793 bp,共编码1 446个氨基酸。Ec MR的蛋白结构域包括1个信号肽(signal peptide)、1个富含蓖麻类β型三叶草结构域(RICIN)、1个Ⅱ型纤维连接蛋白结构域(FNⅡ)、8个串联的C-型凝集素样结构域(CLECTs)以及1个跨膜结构域(transmembrane region)。实时定量PCR(qRTPCR)和细胞免疫荧光(IF)分析结果显示,Ec MR在斜带石斑鱼的8个组织中均有表达,其mRNA的相对表达量顺序为鳃头肾脑脾脏肝脏外周血心脏肌肉。在研究Ec MR是否参与RGNNV入侵过程中时发现,RGNNV可以在GF-1细胞系中快速增殖,同时显著激活Ec MR的表达。为进一步探究RGNNV对GF-1细胞系的影响,本实验通过双染色法检测了RGNNV感染GF-1细胞系后的细胞凋亡情况,研究表明,RGNNV感染可以促进GF-1细胞系的凋亡,并且细胞凋亡率随着RGNNV感染时间延长而增加。同时,qRT-PCR和酶活性检测结果显示,RGNNV的感染可以显著促进凋亡相关基因的转录水平以及Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的酶活性水平。综上所述,本研究成功克隆了EcMR,并揭示了其在RGNNV入侵过程中一定的相关性。本研究结果将为石斑鱼病毒性疾病的防控提供参考。

关 键 词:斜带石斑鱼  甘露糖受体  赤点石斑鱼神经坏死病毒  凋亡
收稿时间:2020/8/25 0:00:00
修稿时间:2020/12/4 0:00:00

Molecular cloning and functional study of mannose receptor gene in Epinephelus coioides
ZHANG Menglan,QIN Zhendong,LU Zhijie,ZHAO Lijuan,PAN Gan,LIN Li.Molecular cloning and functional study of mannose receptor gene in Epinephelus coioides[J].Journal of Fisheries of China,2021,45(8):1279-1295.
Authors:ZHANG Menglan  QIN Zhendong  LU Zhijie  ZHAO Lijuan  PAN Gan  LIN Li
Institution:South China Normal University College of Life Science,,,,,Zhongkai University of Agriculture and Engineering
Abstract:
Keywords:Epinephelus coioides  mannose receptor  red-spotted grouper nervous necrosis virus  apoptosis
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