草鱼呼肠孤病毒NS79蛋白多克隆抗体制备 |
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引用本文: | 孙效迎,裴超,宋华丽,高岩,陈芳,孔祥会.草鱼呼肠孤病毒NS79蛋白多克隆抗体制备[J].河南水产,2018(2). |
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作者姓名: | 孙效迎 裴超 宋华丽 高岩 陈芳 孔祥会 |
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作者单位: | 河南师范大学水产学院 |
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摘 要: | 草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)隶属于呼肠孤病毒科,水生呼肠孤病毒属,该病毒引起草鱼鱼种出现严重的出血病。GCRV基因组由11个分节段的双链RNA构成,NS79是由草鱼呼肠孤病毒GCRV-HN14株S4节段编码的蛋白。根据草鱼呼肠孤病毒编码NS79的c DNA序列,经PCR扩增NS79基因部分片段,将目的基因片段插入原核表达载体p ET-32a(+),构建重组表达质粒NS79E-p ET-32a,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达出来融合蛋白分子量约为35k Da,表达的重组蛋白用Ni-IDASefinose(TM)树脂纯化后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,采用ELISA法测定其效价大于1:64000。这些结果为NS79蛋白功能的深入研究提供基础。
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