小麦条锈菌效应蛋白Hasp58抑制植物免疫的功能分析

为明确小麦条锈菌吸器特异表达效应蛋白Hasp58抑制植物免疫的功能，利用PCR获得Hasp58的全长cDNA序列；借助生物信息学软件预测Hasp58的信号肽；将Hasp58构建到pGR106载体用于农杆菌（Agrobactrium tumefacien）介导的烟草瞬时表达系统，明确Hasp58抑制细胞坏死的毒性功能；将Hasp58构建到pCambia1302载体用于烟草细胞定位，明确Hasp58定位情况；将Hasp58构建到pEDV6载体用于荧光假单胞杆菌（Pseudomonas fluorescens）介导的小麦瞬时表达系统,对小麦胼胝质、过敏性坏死面积、活性氧、菌丝面积、菌丝长度进行统计分析，明确Hasp58抑制寄主植物PAMPs引发的免疫反应（PTI）和效应蛋白诱导的免疫反应（ETI）功能。结果表明，条锈菌Hasp58的cDNA全长为1 026 bp，编码342个氨基酸，N端含26_aa的信号肽；通过农杆菌侵染，在烟草中瞬时表达Hasp58，发现其能够抑制由BAX诱导的细胞坏死，为条锈菌的候选效应蛋白；烟草细胞定位发现，含有信号肽和缺失信号肽的Hasp58与GFP融合表达均定位在细胞质，推测该效应蛋白在胞质作用；利用细菌的三型分泌系统在小麦中瞬时表达Hasp58，发现其能够抑制荧光假单胞杆菌引起的胼胝质积累，导致由无毒性条锈菌小种CYR23引起的小麦过敏性坏死面积和活性氧减少，使菌丝面积和长度增加。推测小麦条锈菌效应蛋白Hasp58可抑制寄主植物的PAMPs引发的免疫反应（PTI）和效应蛋白诱导的免疫反应（ETI），并促进自身侵染。

Functional Analysis of Puccinia striiformis f. sp. tritici Effector Hasp58 Inhibits Plant Immunity