| 茶树RAPD反应系统和扩增程序优化 |
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| 引用本文： | 陈亮,高其康.茶树RAPD反应系统和扩增程序优化[J].茶叶科学,1998,18(1):16-20. |
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| 作者姓名： | 陈亮 高其康 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院茶叶研究所!杭州，310008，浙江农业大学!杭州，310029，中国农业科学院茶叶研究所!杭州，310008，中国农业科学院茶叶研究所!杭州，310008，浙江农业大学!杭州，310029 |
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| 基金项目： | 九五”国家攻关专题!96-014-01-05，农业部重点专题!95农-01-03-01，中国农业科学院院长基金 |
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| 摘 要： | 以龙井43为材料，使用国产PCR仪，对茶树RAPD分析中影响PCR扩增结果的因素进行了研究，确定了茶树RAPD的最适反应系统和扩增程序，即在25μl反应体系中，含25～50ng模板DNA、2mmol／LMgCl2、各0．2mmo／LdNTPs、0．2μmol／L引物和0．5～1．0UTanDNA聚合酶；扩增程序为：94℃预变性180s，94℃变性60s，38℃退火90s，72℃延伸120s，共进行40～45个循环，最后72℃延伸300～600s，这样可以取得较好的扩增结果。
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| 关 键 词： | 茶树 RAPD 反应系统 扩增程序 |
Optimun Amplification Procedure and Reaction System for RAPD Analysis of Tea Plant (Camellia sinensis (L.) O.Kuntze) |
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| Chen Liang, Gao Qikang, Yang Yajun, Yu Fulian, Chen Daming.Optimun Amplification Procedure and Reaction System for RAPD Analysis of Tea Plant (Camellia sinensis (L.) O.Kuntze)[J].Journal of Tea Science,1998,18(1):16-20. |
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| Authors: | Chen Liang Gao Qikang Yang Yajun Yu Fulian Chen Daming |
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| Abstract: | The optimal reaction mixture and amplification procedure of RAPD in tea plant Camellia sinensis (L. )O. Kuntze] was studied with Chinese thermocycle machine Model-1109 (2A)). The results showed that each 25 μl amplification reaction solution was consisted of 25-50 ng template DNA, 2 mmol/L MgCl2,0. 2 mmol/L dNTP of each, 0.2 μmol/L primer and 0.5-1.0U Taq DNA polymerase. The amplification procedure conditions were predenature at 94℃ 180 s followed by denature at 94℃ 60 s, anealing 38℃ for 90 s, extension 72℃ for 120 s, cycling from 40 to 45 times, last extension 300-600 s and then the optimum procedure for tea plant DNA amplification was obtained. |
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| Keywords: | Tea plant (Camellia sinensis) RAPD Amplification reaction mixture Thermal procedure |
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