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栽培大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)全长cDNA的克隆及原核表达
引用本文:崔喜艳,董雅致,刘晓庆,张治安.栽培大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)全长cDNA的克隆及原核表达[J].中国油料作物学报,2014,36(3):329.
作者姓名:崔喜艳  董雅致  刘晓庆  张治安
作者单位:1.吉林农业大学生命科学学院,吉林 长春,130118;2. 吉林农业大学农学院,吉林 长春,130118
基金项目:国家自然科学基金项目(31171459);吉林省自然科学基金项目(201215178)
摘    要:根据NCBI中发表的大豆Rubisco小亚基基因(rbcS)序列(AF303939-1)设计特异引物,以吉农13大豆为实验材料,采用Trizol法提取叶片总RNA,通过RT-PCR克隆大豆rbcS的cDNA。将该基因与原核表达载体pET-30a(+)连接,转化大肠杆菌E.coli BL21感受态细胞,双酶切鉴定后筛选阳性克隆,测序结果显示:rbcS全长 696bp,其中开放阅读框为537bp,编码178个氨基酸;选择含大豆rbcS cDNA阳性克隆菌液IPTG诱导,经SDS-PAGE分析,诱导表达出分子量为29.1kDa的融合蛋白,表达产物大小与预计理论值相符。诱导7h蛋白表达量最高,为64.15%。

关 键 词:栽培大豆  rbcS  基因克隆  原核表达

Cloning and prokaryotic expression of full-length cDNA of Rubisco small subunit gene (rbcS) in Glyine max
CUI Xi-yan,DONG Ya-zhi,LIU Xiao-qing,ZHANG Zhi-an.Cloning and prokaryotic expression of full-length cDNA of Rubisco small subunit gene (rbcS) in Glyine max[J].Chinese Journal of Oil Crop Sciences,2014,36(3):329.
Authors:CUI Xi-yan  DONG Ya-zhi  LIU Xiao-qing  ZHANG Zhi-an
Abstract:
Keywords:Glyine max  rbcS gene  Gene cloning  Prokaryotic expression
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