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龙眼胚性愈伤组织γ-ECS基因的克隆及表达分析
引用本文:任敬敬,赖钟雄.龙眼胚性愈伤组织γ-ECS基因的克隆及表达分析[J].热带作物学报,2013,34(7):1300-1308.
作者姓名:任敬敬  赖钟雄
作者单位:1 福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室 3 湖南省郴州市第二中学;1 福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室 2 福建农林大学农业部东南黄红麻科学观测实验站;1 福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室 2 福建农林大学农业部东南黄红麻科学观测实验站;1 福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室 2 福建农林大学农业部东南黄红麻科学观测实验站;广西大学农学院;1 福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室 2 福建农林大学农业部东南黄红麻科学观测实验站;1 福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室 2 福建农林大学农业部东南黄红麻科学观测实验站
基金项目:农业部东南黄/红麻科学观测实验站项目(农科教发2011-9);国家948计划(No.2013-207);福建省科技计划重点项目(No. 2011N0005)。
摘    要:为探讨红麻细胞质雄性不育形成的分子遗传机理,以红麻细胞质不育系L23A和保持系L23B开花期叶片为材料,对其红麻蛋白质双向电泳体系进行研究,比较TCA/丙酮和酚抽提法提取红麻叶片总蛋白,同时优化上样量和样品制备方法,建立了红麻蛋白质的双向电泳技术体系和凝胶成像染色法,利用PDquest软件分析双向电泳凝胶的相关差异蛋白。结果表明:(1)TCA/丙酮法比酚抽提法更适合于ISO-DALT电泳系统;(2)TCA/丙酮提取的红麻叶片粗蛋白平均产量为31.67 mg/g,是酚抽提法的1.77倍, 但裂解效率为160 mg/g,是酚抽提法的36%;(3)每根胶条最佳上样量为300 μg;(4)考马斯亮蓝G-250比R-250以及银染色法效果更佳,在17 cm×17 cm的凝胶上平均可获得708个蛋白质点。本研究建立的红麻细胞质雄性不育系与保持系总蛋白提取方法及双向电泳体系,可为揭示红麻雄性不育分子机理奠定基础。

关 键 词:红麻  细胞质雄性不育(CMS)  提取方法  双向电泳(2-DE)  ISO-DALT

The Total Protein Extraction and Two-dimensional Electrophoresis System Optimization of the Kenaf Cytoplasmic Male Sterility and Maintaining
REN Jingjing and LAI Zhongxiong.The Total Protein Extraction and Two-dimensional Electrophoresis System Optimization of the Kenaf Cytoplasmic Male Sterility and Maintaining[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2013,34(7):1300-1308.
Authors:REN Jingjing and LAI Zhongxiong
Institution:1 Key Laboratory of Ministry of Education for Genetics, Breeding and Multiple Utilization of Crops, Fujian Agriculture and Forestry University 3 NO.2 High-School of Chenzhou;1 Key Laboratory of Ministry of Education for Genetics, Breeding and Multiple Utilization of Crops, Fujian Agriculture and Forestry University 2 Southeast Jute&Kenaf Scientific 0bservation Stations of Ministry of Agriculture;1 Key Laboratory of Ministry of Education for Genetics, Breeding and Multiple Utilization of Crops, Fujian Agriculture and Forestry University 2 Southeast Jute&Kenaf Scientific 0bservation Stations of Ministry of Agriculture;1 Key Laboratory of Ministry of Education for Genetics, Breeding and Multiple Utilization of Crops, Fujian Agriculture and Forestry University 2 Southeast Jute&Kenaf Scientific 0bservation Stations of Ministry of Agriculture;NO.2 High-School of Chenzhou;1 Key Laboratory of Ministry of Education for Genetics, Breeding and Multiple Utilization of Crops, Fujian Agriculture and Forestry University 2 Southeast Jute&Kenaf Scientific 0bservation Stations of Ministry of Agriculture;1 Key Laboratory of Ministry of Education for Genetics, Breeding and Multiple Utilization of Crops, Fujian Agriculture and Forestry University 2 Southeast Jute&Kenaf Scientific 0bservation Stations of Ministry of Agriculture
Abstract:
Keywords:Kenaf  Cytoplasmic male sterility  Extraction method  Two-dimensional electrophoresis  ISO-DALT
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