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芒果尖孢炭疽病病原菌的绿色荧光蛋白基因标记
引用本文:张俊,吕延超,刘晓妹,张欣,张贺,蒲金基.芒果尖孢炭疽病病原菌的绿色荧光蛋白基因标记[J].热带作物学报,2011,32(9):1708-1710.
作者姓名:张俊  吕延超  刘晓妹  张欣  张贺  蒲金基
作者单位:1. 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所;海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室 海南儋州 571737;海南大学环境与植物保护学院,海南海口 57022
2. 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所;海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室 海南儋州 571737
3. 海南大学环境与植物保护学院,海南海口,570228
基金项目:芒果病虫害综合防控及保鲜技术研究与示范(No.201203092-2); 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所基本业务费(No.2010hzsZDZX002)
摘    要:芒果炭疽病是世界性的主要病害之一,引起芒果炭疽病的病原菌有胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌2种。通过溶壁酶酶解菌丝体成功制备尖孢炭疽菌原生质体,用抗潮霉素基因作为选择标记,采用PEG介导的原生质体转化法,用绿色荧光蛋白表达载体(pCT74-sGFP)转化原生质体,获得表达GFP尖孢炭疽菌的转化子菌株;转化子菌株在含潮霉素平板上经多次单孢纯化后,在无选择压下连续继代培养仍能发出稳定而强烈的绿色荧光,用GFP特异性引物PCR扩增转化子菌株基因组DNA获得预期大小片段,表明gfp基因已成功导入芒果炭疽病病原菌基因组中,且稳定遗传;GFP标记菌株生长正常,致病性和野生型菌株无明显差别,这为进一步研究该病菌在自然界的生物学及侵染方式奠定了基础。

关 键 词:芒果炭疽病  尖孢炭疽菌  绿色荧光蛋白基因  转化

Green Fluorescent Protein Transformed Colletotrichum acutatum from Mango
ZHANG Jun,LV Yanchao,LIU Xiaomei,ZHANG Xin,ZHANG He and PU Jinji.Green Fluorescent Protein Transformed Colletotrichum acutatum from Mango[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2011,32(9):1708-1710.
Authors:ZHANG Jun  LV Yanchao  LIU Xiaomei  ZHANG Xin  ZHANG He and PU Jinji
Institution:ZHANG Jun1,2,LV Yanchao1,LIU Xiaomei2,ZHANG Xin1,ZHANG He1,PU Jinji1 1 Environment and Plant Protection Institute,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Key Laboratory of Pests and Diseases Detection and Control For Tropical Agriculture of Hainan Province,Danzhou,Hainan 571737,China 2 College of Environment and Plant Protection,Hainan University,Haikou,Hainan 570228,China
Abstract:Mango anthracnose is a major disease on mango(Mangifera indica L.),caused by Colletotrichum gloeosporioides and(or)C.acutatum.The protoplasts of a C.acutatum the strain T7 were prepared by digesting the mycelia with lywallzyme.Furthermore,the expression vector pPCT74-sGFP was transformed into the protoplasts with PEG mediated method.Transformation were regenerated and selected on hygromycin-containing medium.Single-spore isolates obtained and showed strong green fluorescence after several successive generat...
Keywords:Mango anthracnose  Colletotrichum acutatum  Gfp gene  Transformantion  
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