| 玉米Opaque-2基因在毕赤酵母中的表达 |
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| 引用本文： | 周志强,宋丽雅,颜娜,张世煌,李新海,郝转芳,翁建峰,白丽,李明顺.玉米Opaque-2基因在毕赤酵母中的表达[J].玉米科学,2014,22(5):6-12,19. |
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| 作者姓名： | 周志强 宋丽雅 颜娜 张世煌 李新海 郝转芳 翁建峰 白丽 李明顺 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点实验室, 北京100081;北京工商大学/北京市植物资源研究开发重点实验室, 北京100048;中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点实验室, 北京100081;中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点实验室, 北京100081;中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点实验室, 北京100081;中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点实验室, 北京100081;中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点实验室, 北京100081;中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点实验室, 北京100081;中国农业科学院作物科学研究所/农业部遗传育种重点实验室, 北京100081 |
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| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系建设专项（CARS-02-01）、中央级公益性科研院所基本科研业务费专项、北京市自然科学基金项目（6112003） |
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| 摘 要： | 从玉米自交系辽2345授粉后18 d的胚乳中提取总RNA，经反转录后得到第一链cDNA，利用Opaque-2基因的特异引物克隆出该基因的全编码区，将该编码区的全序列以正确的阅读框架利用Infusion同源重组的方法亚克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9的α因子下游，并置于AOXⅠ启动子控制下，利用pPIC9表达载体上的特异引物进行PCR鉴定，鉴定后的重组质粒用Bgl Ⅱ酶切线性化后，电转化导入甲醇型毕赤酵母菌株GS115中，利用MM、MD和菌落PCR的方法筛选出Mut+表型，得到的重组子以甲醇诱导表达蛋白。经SDS-PAGE结果显示，Opaque-2蛋白得到表达，其相对分子质量（Mr）约为47 KD。
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| 关 键 词： | 玉米 Opaque-2 毕赤酵母 蛋白表达 |
| 收稿时间： | 2013/11/14 0:00:00 |
Maize Opaque-2 Gene Expression in Pichia pastoris |
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| ZHOU Zhi-qiang,SONG Li-y,YAN N,ZHANG Shi-huang,LI Xin-hai,HAO Zhuan-fang,WENG Jian-feng,BAI Li and LI Ming-shun.Maize Opaque-2 Gene Expression in Pichia pastoris[J].Journal of Maize Sciences,2014,22(5):6-12,19. |
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| Authors: | ZHOU Zhi-qiang SONG Li-y YAN N ZHANG Shi-huang LI Xin-hai HAO Zhuan-fang WENG Jian-feng BAI Li and LI Ming-shun |
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| Institution: | Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100081;Beijing Technology and Business University/Beijing Key Laboratory of Plant Resources Research and Development, Beijing 100048, China;Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100081;Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100081;Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100081;Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100081;Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100081;Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100081;Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Crop Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100081 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Maize Opaque-2 Pichia pastoris Protein expression |
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