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柑橘脉突病毒实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用
引用本文:王艳娇,崔甜甜,黄爱军,陈洪明,李中安,周常勇,宋震.柑橘脉突病毒实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用[J].园艺学报,2016,43(8):1613-1620.
作者姓名:王艳娇  崔甜甜  黄爱军  陈洪明  李中安  周常勇  宋震
作者单位:(西南大学/中国农业科学院柑桔研究所,重庆 400712;赣南师范大学国家脐橙工程研究中心,江西赣州341000)
基金项目:农业部公益性行业(农业)科研专项经费项目(201203076),重庆市基础及前沿研究项目(CSTC2014jcyjA80033),重庆市两江学者计划项目
摘    要:为了快速、灵敏地检测柑橘脉突病毒(Citrus vein enation virus,CVEV),通过设计特异性引物(EVq F4/EVq R4),优化反应条件,建立了CVEV的实时荧光定量RT-PCR检测体系。该方法特异性良好;检测灵敏度比常规RT-PCR高100倍;标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.992,扩增效率101.8%;检测组内和组间变异系数均小于2.85%,重复性较好。利用所建立的实时荧光定量方法对柑橘植株进行检测发现,‘代代酸橙’和‘象山红’植株中CVEV分布不均匀,其中根部病毒滴度最高,分别为162.52和45.32拷贝·ng~(-1) RNA,皮及叶部病毒滴度相对较低。

关 键 词:柑橘脉突病毒  实时荧光定量RT-PCR  

Development and Application of a Quantitative RT-PCR Approach for Quantification of Citrus vein enation virus
WANG Yan-jiao,CUI Tian-tian,HUANG Ai-jun,CHEN Hong-ming,LI Zhong-an,ZHOU Chang-yong,SONG Zhen.Development and Application of a Quantitative RT-PCR Approach for Quantification of Citrus vein enation virus[J].Acta Horticulturae Sinica,2016,43(8):1613-1620.
Authors:WANG Yan-jiao  CUI Tian-tian  HUANG Ai-jun  CHEN Hong-ming  LI Zhong-an  ZHOU Chang-yong  SONG Zhen
Institution:(;1.Citrus Research Institute of Southwest University,Citrus Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences,Chongqing 400712,China;;2.National Navel Orange Engineering Research Center of Gannan Normal University,Ganzhou,Jiangxi 341000,China)
Abstract:
Keywords:Citrus vein enation virus (CVEV)  quantitative RT-PCR  application
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