| 山葡萄转录因子VaMYB4a互作蛋白的筛选与鉴定 |
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| 引用本文： | 俞沁含,李俊铎,崔莹,王佳慧,郑巧玲,徐伟荣.山葡萄转录因子VaMYB4a互作蛋白的筛选与鉴定[J].园艺学报,2023(3):508-522. |
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| 作者姓名： | 俞沁含 李俊铎 崔莹 王佳慧 郑巧玲 徐伟荣 |
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| 作者单位： | 1. 宁夏大学农学院;2. 宁夏大学食品与葡萄酒学院;3. 葡萄与葡萄酒教育部工程研究中心;4. 宁夏优势特色作物现代分子育种重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（32060672）； |
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| 摘 要： | 以抗寒种质山葡萄(Vitis amurensis Rupr.)‘左山–1’叶片组织为试材，通过Gateway技术构建酵母均一化cDNA文库，库容量为1.36×107 cfu·mL-1，外源基因插入片段均大于1 kb，重组率为100%，符合后续试验要求。以VaMYB4a113-252C端调控区段为诱饵，经酵母双杂交筛选获得17个候选互作蛋白，选取2个与非生物胁迫应答密切相关的候选互作蛋白分别在酵母、拟南芥原生质体中进行互作验证，发现锌指类转录因子VaCOL4、VaCOL5均与VaMYB4a全长及VaMYB4a113-252存在互作关系。经系统进化与蛋白保守结构域分析，推测葡萄COL基因家族中VaCOL2与VaMYB4a具有潜在互作关系，进而通过BiFC验证表明，VaCOL2与VaMYB4发生蛋白互作；顺式作用元件预测表明VvCOL2、VvCOL4与VvCOL5启动子区包含多个激素及逆境应答相关元件，其中VvCOL2包括多个低温响应元件(LTRE)；低温胁迫下，VaMYB4a、VaCOL4与VaCOL5...
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| 关 键 词： | 山葡萄 低温胁迫 Gateway酵母双杂交文库 VaMYB4a VaCOL 互作分析 |
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