| 猕猴桃GalUR表达与抗坏血酸积累的关系 |
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| 引用本文： | 李明军,刘军,梁东,郭春苗,马锋旺.猕猴桃GalUR表达与抗坏血酸积累的关系[J].园艺学报,2011,38(9):1641-1649. |
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| 作者姓名： | 李明军 刘军 梁东 郭春苗 马锋旺 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研基金项目(20090204110009); 国家自然科学基金项目(30871700) |
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| 摘 要： | 通过RT-PCR从美味猕猴桃（Actinidia deliciosa）果实中克隆了D–半乳糖醛酸还原酶（GalUR）全长 cDNA序列，并分析其序列特征，进行原核表达，制备特异抗体，分析其mRNA及蛋白表达水平与果实发育过程及不同组织中抗坏血酸（AsA）合成和积累的关系。结果表明：克隆的GalUR cDNA（GenBank登录号为GU339035）包含的最大开放阅读框（open reading frame，ORF）为990 bp，编码329个氨基酸残基，预测分子量为37 kD，与报道的草莓等其他植物GalUR具有较高的相似性。构建的pET-32a（＋）-GalUR载体在大肠杆菌BL21（E. coli BL21）中异源表达后，获得了主要以包涵体存在约58 kD的融合蛋白GalUR-His（His约21 kD）。以该蛋白制备抗体，与重组蛋白的Western杂交表明该抗体能与GalUR蛋白发生特异反应。对猕猴桃可溶性蛋白杂交显示，猕猴桃体内GalUR蛋白的分子量约37 kD。在猕猴桃不同组织和发育过程中，GalUR表达水平与AsA含量表现为高度一致，但前体饲喂发现，与L–半乳糖相比，D–半乳糖醛酸并不能有效促进猕猴桃AsA的合成。这些结果表明以单体形式存在的GalUR与猕猴桃AsA合成有着密切关系，但它可能并不是猕猴桃AsA积累的主要调控环节。
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| 关 键 词： | 猕猴桃 D–半乳糖醛酸还原酶 原核表达 Western 杂交 维生素C |
| 收稿时间： | 2011-5-6 |
| 修稿时间： | 2011-9-7 |
The Relationship Between GalUR Expression and Ascorbate Accumulation in Kiwifruit |
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| LI Ming-jun,LIU Jun,LIANG Dong,GUO Chun-miao, MA Feng-wang.The Relationship Between GalUR Expression and Ascorbate Accumulation in Kiwifruit[J].Acta Horticulturae Sinica,2011,38(9):1641-1649. |
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| Authors: | LI Ming-jun LIU Jun LIANG Dong GUO Chun-miao MA Feng-wang |
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| Institution: | LI Ming-jun,LIU Jun,LIANG Dong,GUO Chun-miao,and MA Feng-wang*(College of Horticulture,Northwest A & F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | kiwifruit D-galacturonate reductase prokaryotic expression Western blotting vitamin C |
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