| 西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用 |
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| 引用本文： | 焦楠,朱宁,程春振,林玉玲,李汉生,陈发兴,赖钟雄.西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用[J].果树学报,2019(7). |
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| 作者姓名： | 焦楠 朱宁 程春振 林玉玲 李汉生 陈发兴 赖钟雄 |
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| 作者单位： | 福建农林大学园艺植物生物工程研究所 |
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| 摘 要： | 【目的】建立西番莲夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus, TeMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的双重RT-PCR检测体系。【方法】根据TeMV和CMV的外壳蛋白(coat protein, CP)基因序列,分别设计两对特异性引物,并对引物组合浓度、退火温度和循环次数进行优化。【结果】优化结果显示:TeMV和CMV最佳引物组合浓度分别为2.0 mmol·L~(-1)和8.0 mmol·L~(-1);最佳退火温度为57℃;最佳循环次数为35次。【结论】灵敏度分析结果显示,在样品c DNA原液稀释到10-5时,仍能检测到两种病毒扩增出的目的条带。同时,以健康组培苗作为对照组,应用建立的双重RT-PCR检测技术对采集于福建省不同产地的36份西番莲样品进行了病毒检测,发现有8份样品同时感染两种病毒,8份样品仅感染TeMV,10份样品仅感染CMV。本研究可为西番莲TeMV和CMV的检测提供便利。
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| 关 键 词： | 西番莲 夜来香花叶病毒 黄瓜花叶病毒 病毒检测 双重RT-PCR技术 |
Establishment and application of the Telosma mosaic virus and Cucumber mosaic virus Duplex RT-PCR System in passionfruit |
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