|
|||||
|
|
| 润楠ISSR-PCR优化反应体系建立及引物筛选 | |
| 引用本文： | 刘玉香,宋晓琛,江香梅.润楠ISSR-PCR优化反应体系建立及引物筛选[J].林业科技开发,2013,27(5):24-28. |
| 作者姓名： | 刘玉香 宋晓琛 江香梅 |
| 作者单位： | 1. 江西农业大学园林与艺术学院,南昌,330045 2. 江西省林业科学院国家林业局樟树工程技术研究中心 3. 江西农业大学园林与艺术学院,南昌330045;江西省林业科学院国家林业局樟树工程技术研究中心 |
| 基金项目： | 林业公益性行业科研专项，江西省财政林业重大科技专项"樟科树种种质基因库营建及产业化利用研究" |
| 摘 要： | 以润楠基因组总DNA为材料,利用单因素试验设计方法,对影响ISSR-PCR扩增的模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物、Tag DNA聚合酶以及去离子甲酰胺等试验因子进行了优化试验,筛选出16条有效引物并确定了它们的退火温度,并检测了体系的重复性。优化后的反应体系为:20μL PCR反应体积中,10×PCR Buffer 2μL,2.0mmol/L Mg2+1.6μL,0.2 mmol/L dNTPs 2μL,0.4 mmol/L引物0.8μL,0.5U Taq DNA聚合酶0.1μL,40 ng DNA模板1.0μL,1.5%去离子甲酰胺0.3μL,ddH2O 12.2μL。扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性30 s,据不同引物的退火温度复性45 s,72℃延伸90 s,反应37个循环,最后在72℃延伸7 min。润楠ISSR-PCR反应体系的建立为利用ISSR分子标记技术研究润楠的遗传多样性奠定了良好的基础。 |
| 关 键 词： | 润楠 ISSR 体系优化 引物筛选 |
Optimization of ISSR-PCR reaction system and primers screening in Machilus pingii |
|
| LIU Yu-xiang , SONG Xiao-chen , JIANG Xiang-mei.Optimization of ISSR-PCR reaction system and primers screening in Machilus pingii[J].China Forestry Science and Technology,2013,27(5):24-28. | |
| Authors: | LIU Yu-xiang SONG Xiao-chen JIANG Xiang-mei |
| Institution: | LIU Yu-xiang;SONG Xiao-chen;JIANG Xiang-mei;Jiangxi Agricultural University; |
| Abstract: | |
| Keywords: | Machilus pingii ISSR optimization system primers screening |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |