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药用半枫荷基因组总DNA提取及ISSR-PCR反应体系优化
引用本文:仝大伟,刘强,林婉,汪源,张颖.药用半枫荷基因组总DNA提取及ISSR-PCR反应体系优化[J].林业科技,2011,36(3):5-8.
作者姓名:仝大伟  刘强  林婉  汪源  张颖
作者单位:1. 海南师范大学生命科学学院,海口,571158
2. 成都农业科技职业学院,四川成都,610000
基金项目:海南省教育厅项目,海南师范大学校级大学生创新性实验计划项目,2010国家级创新实验项目
摘    要:利用正交试验设计方法,对影响ISSR-PCR反应的Mg2+、dNTPs、引物和Taq DNA聚合酶等因素进行优化的结果表明:在20μL PCR反应体系中含10×PCR Buffer,0.018μmol/L引物,4.0 mmol/L Mg2+,15 ng/μL模板DNA,1.5 U Taq DNA聚合酶,4种dNTPs各0.15 mmol/L为半枫荷ISSR-PCR最适反应体系。

关 键 词:半枫荷  DNA提取  ISSR-PCR  优化

Total DNA Extraction and ISSR- PCR Reaction System Optimization of Semiliquidambar cathayensis
TONG Dawei.Total DNA Extraction and ISSR- PCR Reaction System Optimization of Semiliquidambar cathayensis[J].Forestry Science & Technology,2011,36(3):5-8.
Authors:TONG Dawei
Institution:TONG Dawei(Hainan Normal University,Haikou 571158)
Abstract:In order to establish the optimal system of ISSP-PCR reaction for Semiliquidambar cathayensis,the parameters including template DNA,primers,dNTPs,Mg2+ concentration,dose of Taq DNA polymerase were systematically analyzed.The results showed that the optimal ISSR-PCR reaction was carry out in a volume 20 μL containing 10×PCR Buffer,0.018umol/L Primer,4.0mmol/L Mg2+,1.5U Taq DNA polymerase,4 dNTPs each 0.15 mmol / L.
Keywords:ISSR-PCR
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