| 基于毛细管电泳的日本落叶松MSAP反应体系的建立 |
| |
| 引用本文： | 刁姝,孙超,孙晓梅,张守攻.基于毛细管电泳的日本落叶松MSAP反应体系的建立[J].林业科学研究,2017,30(3):361-367. |
| |
| 作者姓名： | 刁姝 孙超 孙晓梅 张守攻 |
| |
| 作者单位： | 中国林业科学研究院林业研究所, 国家林业局林木培育重点实验室, 北京 100091;中国林业科学研究院林业研究所, 国家林业局林木培育重点实验室, 北京 100091;中国林业科学研究院林业研究所, 国家林业局林木培育重点实验室, 北京 100091;中国林业科学研究院林业研究所, 国家林业局林木培育重点实验室, 北京 100091 |
| |
| 基金项目： | 林业公益性行业科研专项经费重点项目（20150414） |
| |
| 摘 要： | 目的]建立基于毛细管电泳的日本落叶松最佳MSAP反应体系,获得条带清晰,信号强度均一的DNA甲基化图谱,为今后开展日本落叶松表观遗传变异研究奠定基础。方法]以日本落叶松未成熟木质部为试材,设置不同梯度的DNA模板用量以及选择扩增体系中引物浓度、Mg~(2+)浓度、dNTP浓度和exTaq DNA聚合酶浓度,确定各组分不同用量对毛细管电泳效果的影响,从而确立最适的MSAP反应体系。结果]结果表明模板DNA以及exTaq DNA聚合酶浓度对毛细管电泳结果影响不明显,而高的引物浓度会引起条带的减少。Mg~(2+)及dNTP浓度是影响毛细管电泳结果最为关键的因素,浓度过低或过高会导致毛细管电泳图谱条带明显减少,杂峰显著增多。结论]最终确立的反应体系为:DNA模板100 ng,引物0.75 pmol·μL~(-1),Mg~(2+)2 mmol·L~(-1),dNTP 0.375 mmol·L~(-1)和exTaq DNA聚合酶0.05 U·μL~(-1)。
|
| 关 键 词： | DNA甲基化 甲基化敏感扩增多态性（MSAP） 毛细管电泳 体系建立 日本落叶松 |
| 收稿时间： | 2016/9/21 0:00:00 |
Establishment of Larix kaempferi MSAP System Based on Capillary Electrophoresis |
| |
| DIAO Shu,SUN Chao,SUN Xiao-mei and ZHANG Shou-gong.Establishment of Larix kaempferi MSAP System Based on Capillary Electrophoresis[J].Forest Research,2017,30(3):361-367. |
| |
| Authors: | DIAO Shu SUN Chao SUN Xiao-mei and ZHANG Shou-gong |
| |
| Institution: | Research Institute of Forestry, Chinese Academy of Forestry, Key Laboratory of Tree Breeding and Cultivation, State Forestry Administration, Beijing 100091, China;Research Institute of Forestry, Chinese Academy of Forestry, Key Laboratory of Tree Breeding and Cultivation, State Forestry Administration, Beijing 100091, China;Research Institute of Forestry, Chinese Academy of Forestry, Key Laboratory of Tree Breeding and Cultivation, State Forestry Administration, Beijing 100091, China;Research Institute of Forestry, Chinese Academy of Forestry, Key Laboratory of Tree Breeding and Cultivation, State Forestry Administration, Beijing 100091, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | DNA methylation methylation sensitive amplification polymorphism (MSAP) capillary electrophoresis system establishment Larix kaempferi |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《林业科学研究》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《林业科学研究》下载免费的PDF全文 |
|
