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红椿SSR-PCR体系建立和多态性引物筛选
引用本文:湛欣,鲁好君,赵帅,陈晓阳,邓小梅.红椿SSR-PCR体系建立和多态性引物筛选[J].林业科学研究,2016,29(4):565-570.
作者姓名:湛欣  鲁好君  赵帅  陈晓阳  邓小梅
作者单位:华南农业大学 林学与风景园林学院/广东省森林植物种质创新与利用重点实验室, 广东 广州 510642;华南农业大学 林学与风景园林学院/广东省森林植物种质创新与利用重点实验室, 广东 广州 510642;华南农业大学 林学与风景园林学院/广东省森林植物种质创新与利用重点实验室, 广东 广州 510642;华南农业大学 林学与风景园林学院/广东省森林植物种质创新与利用重点实验室, 广东 广州 510642;华南农业大学 林学与风景园林学院/广东省森林植物种质创新与利用重点实验室, 广东 广州 510642
基金项目:国家林业局公益性行业专项(201004020)。
摘    要:目的]本研究旨在建立红椿SSR-PCR最佳反应体系,并筛选适于红椿SSR分析的高多态性引物。方法]通过L16(45)正交试验设计,确立红椿SSR-PCR最佳反应体系;利用优化后的体系对来自楝科植物的135对SSR引物,在6个不同的红椿居群中进行扩增,筛出能有效扩增的引物并进一步筛选出适于红椿的高多态性引物。结果](1)10μL基于荧光d UTP的SSR-PCR体系中包含:10×buffer 1.0μL,Taq酶(5 U·μL-1)0.1μL,Mg Cl2(25mmol·L-1)0.8μL,d NTP(200 mmol·L-1)0.025μL,荧光d UTP(1 nmol·μL-1)0.01μL,引物(10 mmol·L-1)0.8μL,DNA模板45 ng剩余用dd H2O补足;(2)筛选出29对能有效扩增的引物,复选后获得了12对适于红椿SSR分析的高多态性引物。结论]建立了SSR-PCR最佳反应体系并筛选出高多态性引物,为红椿的分子标记等遗传学研究提供了基础。

关 键 词:SSR  红椿  体系优化  引物筛选
收稿时间:7/6/2015 12:00:00 AM

Establishment and Primer Screening of SSR-PCR Reaction System for Toona ciliata
ZHAN Xin,LU Hao-jun,ZHAO Shuai,CHEN Xiao-yang and DENG Xiao-mei.Establishment and Primer Screening of SSR-PCR Reaction System for Toona ciliata[J].Forest Research,2016,29(4):565-570.
Authors:ZHAN Xin  LU Hao-jun  ZHAO Shuai  CHEN Xiao-yang and DENG Xiao-mei
Institution:College of Forestry and Landscape Architecture/Guangdong Key Laboratory for Innovative Development and Utilization of Forest Plant Germplasm, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China;College of Forestry and Landscape Architecture/Guangdong Key Laboratory for Innovative Development and Utilization of Forest Plant Germplasm, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China;College of Forestry and Landscape Architecture/Guangdong Key Laboratory for Innovative Development and Utilization of Forest Plant Germplasm, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China;College of Forestry and Landscape Architecture/Guangdong Key Laboratory for Innovative Development and Utilization of Forest Plant Germplasm, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China;College of Forestry and Landscape Architecture/Guangdong Key Laboratory for Innovative Development and Utilization of Forest Plant Germplasm, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China
Abstract:
Keywords:Toona ciliate  SSR-PCR  system optimization  primers screening
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