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利用PMI选择标记进行杨树转基因体系的研究
引用本文:查琳,王伟东,续晨,诸葛强.利用PMI选择标记进行杨树转基因体系的研究[J].林业科学研究,2016,29(2):221-226.
作者姓名:查琳  王伟东  续晨  诸葛强
作者单位:南京林业大学南方现代林业协同创新中心, 江苏 南京 210037;无锡市林木种苗管理站, 江苏 无锡 214000;南京林业大学南方现代林业协同创新中心, 江苏 南京 210037;南京晓庄学院生命科学系, 江苏 南京 210000;南京林业大学南方现代林业协同创新中心, 江苏 南京 210037
基金项目:国家科技部"863计划"课题(2013AA102703)、国家国际科技合作专项 (2014DFG32440)、江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)
摘    要:目的]利用不同于抗生素的PMI为选择标记基因的遗传转化体系,对杨树进行双抗虫基因(Bt和CpTI)的转基因研究.建立杨树以PMI为安全标记基因的转基因体系,为安全、高效的林木转基因育种研究提供实验依据.方法]选择已有的转CpTI抗虫基因(利用Kmr选择标记获得)的美洲黑杨杂种优良无性系南林895杨(Populus ×euramericana ‘Nanlin895’)为受体材料,对杨树叶片、叶片分化芽、茎段生根的甘露糖敏感性等筛选优化,采用农杆菌介导的方法进行双抗虫基因的研究.结果]较为适合的杨树叶片筛选培养基为:甘露糖8 g·L-1和蔗糖22 g·L-1;叶片分化芽筛选培养基为:甘露糖10 g·L-1和蔗糖20 g·L-1;茎段生根筛选培养基:甘露糖8 g·L-1和蔗糖22 g·L-1.在此基础上,获得了转BtCpTI双抗虫基因的植株8株.结论]初步建立了以PMI为安全标记基因的杨树转基因体系:确定了PMI筛选的最适选择压,成功构建了含PMI选择标记基因的植物抗虫表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化最终获得了转双抗虫基因植株.

关 键 词:PMI  选择标记  南林895杨  转基因体系  抗虫
收稿时间:2014/12/15 0:00:00

Poplar Transgenic System by Using PMI as Biosafety Selective Marker
ZHA Lin,WANG Wei-dong,XU Chen and ZHUGE Qiang.Poplar Transgenic System by Using PMI as Biosafety Selective Marker[J].Forest Research,2016,29(2):221-226.
Authors:ZHA Lin  WANG Wei-dong  XU Chen and ZHUGE Qiang
Institution:Co-Innovation Center for Sustainable Forestry in Southern China, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, Jiangsu, China;Wuxi Forest Seed and Seedling Administration, Wuxi 214000, Jiangsu, China;Co-Innovation Center for Sustainable Forestry in Southern China, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, Jiangsu, China;Bioscience Department of Nanjing, Xiaozhuang University, Nanjing 210000, Jiangsu, China;Co-Innovation Center for Sustainable Forestry in Southern China, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, Jiangsu, China
Abstract:
Keywords:
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