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| 构建表达猪瘟病毒E0基因的重组杆状病毒 | |
| 引用本文： | 陈振海,王琴,范学政,宁宜宝,王在时,夏春.构建表达猪瘟病毒E0基因的重组杆状病毒[J].上海农业学报,2006,22(1):10-13. |
| 作者姓名： | 陈振海 王琴 范学政 宁宜宝 王在时 夏春 |
| 作者单位： | 1. 中国兽药监察所农业部兽药创新与生物安全评价重点开放实验室,北京,100081;中国农业大学动物医学院,北京,100094 2. 中国兽药监察所农业部兽药创新与生物安全评价重点开放实验室,北京,100081 3. 中国农业大学动物医学院,北京,100094 |
| 基金项目： | 科技部科研项目;中国科学院资助项目 |
| 摘 要： | 为了得到可溶性重组猪瘟病毒E0蛋白并便于观察重组蛋白的表达情况,将增强型水母绿色荧光蛋白基因(EGFP)与E0基因相连插入昆虫杆状病毒转移载体中,与线性杆状病毒DNA共转染Sf9细胞后通过噬斑纯化得到纯的重组杆状病毒,将其感染Sf9细胞制备P1种子液,同时用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况,剔除表达效果差的重组杆状病毒。再用P1种子液感染Sf9细胞制备高效价的P2种子液。通过病毒液的梯度稀释和噬斑测定,确定P2种子液的病毒滴度达1.14×107pfu/mL。将P2种子液以MOI 5~10接种指数期Sf9细胞,3 d后呈现出最强的荧光。重组杆状病毒在Sf9细胞中的初步成功表达为进一步制备重组E0糖蛋白,研究E0蛋白的结构与功能、免疫诊断新方法和猪瘟基因工程疫苗奠定基础。 |
| 关 键 词： | 猪瘟病毒 E0蛋白 增强型水母绿色荧光蛋白 重组杆状病毒 |
| 文章编号： | 1000-3924（2006）01-10-04 |
| 收稿时间： | 05 31 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 2005-05-312005-12-19 |
Construction of recombinant baculovirus expressing CSFV E0 gene |
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| CHEN Zhen-hai,WANG Qin,FAN Xue-zheng,NING Yi-bao,WANG Zai-shi,XIA Chun.Construction of recombinant baculovirus expressing CSFV E0 gene[J].Acta Agriculturae Shanghai,2006,22(1):10-13. | |
| Authors: | CHEN Zhen-hai WANG Qin FAN Xue-zheng NING Yi-bao WANG Zai-shi XIA Chun |
| Abstract: | |
| Keywords: | Classical swine fever virus(CSFV) E0 protein EGFP Recombinant baculovirus |
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