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| 均匀设计优化猕猴桃SRAP体系 | |
| 引用本文： | 王卫,陈义挺,陈婷,黄新忠,陈小明,胡薇.均匀设计优化猕猴桃SRAP体系[J].福建农林大学学报(自然科学版),2013,42(1). |
| 作者姓名： | 王卫 陈义挺 陈婷 黄新忠 陈小明 胡薇 |
| 作者单位： | 1. 福建师范大学生命科学学院,福建福州350108;福建省农业科学院果树所,福建福350013 2. 福建省农业科学院果树所,福建福,350013 3. 福建师范大学生命科学学院,福建福州,350108 |
| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目，福建省农业科学院科技创新团队重点科研项目，福建省农业科学院双百行动项目 |
| 摘 要： | 采用均匀设计对影响猕猴桃SRAP-PCR体系的5种因素(Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA)进行5因素5水平和5因素3水平的两轮优化,建立猕猴桃SRAP-PCR的最佳体系(25μL):Mg2+2.50 mmol·L-1,dNTPs 0.25 mmol·L-1,引物0.2μmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.25 U,模板DNA 150 ng.扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,53℃复性1 min,72℃延伸1 min,33个循环,72℃延伸10 min. |
| 关 键 词： | 猕猴桃 SRAP 均匀设计 优化 |
Uniform design optimization of SRAP-PCR system in Actinidia chinensis |
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| WANG Wei , CHEN Yi-ting , CHEN Ting , HUANG Xin-zhong , CHEN Xiao-ming , HU Wei.Uniform design optimization of SRAP-PCR system in Actinidia chinensis[J].Journal of Fujian Agricultural and Forestry University,2013,42(1). | |
| Authors: | WANG Wei CHEN Yi-ting CHEN Ting HUANG Xin-zhong CHEN Xiao-ming HU Wei |
| Abstract: | Uniform design was used to optimize SRAP-PCR system in Actinidia chinensis,which included two rounds of optimization.Five influencing factors on SRAP-PCR,including the concentration of Mg2+,dNTPs,primers,Taq DNA polymerase and DNA template were optimized.The results showed that the optimum SRAP-PCR system included Mg2+ 2.50 mmol·L-1,dNTPs 0.25 mmol·L-1,primers 0.2 μmol·L-1,Taq DNA polymerase 1.25 U and DNA template 150 ng in the 25 μL reaction system.The suitable SRAP-PCR protocol was initial denaturing at 94 ℃ for 5 min,then pre-amplifying at 94 ℃ for 1 min,35 ℃ for 1 min,72 ℃ for 1 min for 5 cycles,amplifying for 33 cycles when the annealing temperature was adjusted to 53 ℃,finally extending at 72 ℃ for 10 min. |
| Keywords: | Actinidia chinensis SRAP uniform design optimization |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ | |