| 表达绿色荧光蛋白重组乳酸杆菌的构建及电击转化条件 |
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| 引用本文： | 田兴山,张玲华,周风珍,李国立,孙晓刚.表达绿色荧光蛋白重组乳酸杆菌的构建及电击转化条件[J].华南农业大学学报,2005,26(3):117-119. |
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| 作者姓名： | 田兴山 张玲华 周风珍 李国立 孙晓刚 |
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| 作者单位： | 1. 广东省农业科学院农业生物技术研究所,广东,广州,510640
2. 广东省农业科学院农业生物技术研究所,广东,广州,510640;华南理工大学,生物工程学院,广东,广州,510640 |
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| 基金项目： | 广州市科技攻关重点项目(2003Z2E0221)，广东省农业项目(2003B21403) |
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| 摘 要： | 应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组乳酸杆菌．将pGFP2质粒中的绿色荧光蛋白基因切下，克隆进表达载体质粒pThioHisB的NcoⅠ和SacⅠ位点之间，构建成重组表达质粒pThaioGFP，然后转化大肠杆菌B121．从BL21中提取重组质粒，用电击法转化乳酸杆菌Lac1001，当细菌处于D600nm为0．6的生长期时，使用PEB作为电击缓冲液，对100μL体积的细胞悬液在电容25μF，电阻200Ω，电压2．2kV的电击条件进行完整质粒转化可得到较高的转化率．电击转化后Lacl001于LB培养基上呈绿色，在荧光透射仪下观察，整个菌体发绿色荧光．构建的重组乳酸杆菌能够稳定表达绿色荧光蛋白．
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| 关 键 词： | 绿色荧光蛋白 重组乳酸杆菌 质粒构建 电击 |
| 文章编号： | 1001-411X(2005)03-0117-03 |
Construction of recombinant Lactobacillus expressing green fluorescent protein gene and transformation conditions by electroporation |
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| TIAN Xing-shan,ZHANG Ling-hua.Construction of recombinant Lactobacillus expressing green fluorescent protein gene and transformation conditions by electroporation[J].Journal of South China Agricultural University,2005,26(3):117-119. |
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| Authors: | TIAN Xing-shan ZHANG Ling-hua |
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| Institution: | TIAN Xing-shan~1,ZHANG Ling-hua~ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | green fluorescent protein recombinant Lactobacillus plasmid construction electroporation |
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