| 鸡催乳素受体胞外域的分子克隆及原核表达 |
| |
| 引用本文： | 刘颖,黎敏义,刘志,李孝伟,施振旦.鸡催乳素受体胞外域的分子克隆及原核表达[J].华南农业大学学报,2006,27(4):73-77. |
| |
| 作者姓名： | 刘颖 黎敏义 刘志 李孝伟 施振旦 |
| |
| 作者单位： | 华南农业大学,动物科学学院,广东,广州,510642 |
| |
| 基金项目： | 广东省自然科学基金;高等学校博士学科点专项科研项目 |
| |
| 摘 要： | 根据家鸡催乳素受体基因胞外域序列（GenBank号：D13154）设计并合成1对覆盖编码区58～1249位核苷酸的引物，以家鸡垂体总RNA为模板，经反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法获得了特异性片断，将该片断克隆入pMD18-T载体并转化感受态细菌Ecoli DH5α永久保存．通过设计第2对引物扩增PRLR胞外域cDNA片段，该片段经酶切后克隆到表达载体pRSETA的EcoRⅠ和HindⅢ两酶切位点之间，构建重组质粒pR-PRLR．该质粒在转化感受态细菌E．coli B121（DF．3）后，在IPTG诱导下促使重组菌表达了相对分子质量为53640左右的重组融合蛋白，表达量在0．1mmol／L IPTG诱导5h时达到最高，约占总菌体蛋白的17．6％左右．表达产物可经体积分数为50％的Ni-NTA凝胶纯化，说明重组蛋白中具有正确的His-tag标签及之后的鸡催乳素受体编码区胞外域序列．
|
| 关 键 词： | 鸡催乳素受体基因 胞外域 克隆 表达 纯化 |
| 文章编号： | 1001-411X（2006）04-0073-05 |
| 收稿时间： | 2005-12-29 |
| 修稿时间： | 2005-12-29 |
Molecular Cloning and Prokaryotic Expression of Chicken Prolactin Receptor Extracellular Domain |
| |
| LIU Ying,LI Min-yi,LIU Zhi,LI Xiao-wei,SHI Zhen-dan.Molecular Cloning and Prokaryotic Expression of Chicken Prolactin Receptor Extracellular Domain[J].Journal of South China Agricultural University,2006,27(4):73-77. |
| |
| Authors: | LIU Ying LI Min-yi LIU Zhi LI Xiao-wei SHI Zhen-dan |
| |
| Institution: | College of Animal Science, South China Agric. Univ. , Guangzhou 510642, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | chicken prolactin receptor gene extracellular domain cloning expression purification |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《华南农业大学学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《华南农业大学学报》下载免费的PDF全文 |
