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剑豆SRAP-PCR反应体系的建立及优化
引用本文:刘明骞,陈丽君,欧阳昆唏,丁美美,陈晓阳.剑豆SRAP-PCR反应体系的建立及优化[J].华南农业大学学报,2015,36(1):75-78.
作者姓名:刘明骞  陈丽君  欧阳昆唏  丁美美  陈晓阳
作者单位:1. 华南农业大学林学院/广东省森林植物种质创新与利用重点实验室,广东广州,510642
2. 华南农业大学教学科研基地管理中心,广东广州,510642
基金项目:广州市科技计划项目(2010Z1-E241);农业部948项目(2011-Z50)
摘    要:【目的】建立和优化剑豆Canavalia ensiformis的SRAP-PCR体系,为分析剑豆遗传多样性和建立遗传图谱打下基础.【方法】首先用单因素试验法对SRAP-PCR反应体系的5个主要影响因素(Mg2+、d NTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA)各设8个浓度梯度进行试验,找到5个因素的适宜浓度范围,再采用均匀设计法进行5因素4水平和5因素3水平的2轮优化.【结果和结论】建立了剑豆SRAP-PCR最佳反应体系(25μL):Mg2+1.75 mmol/L,d NTPs 200μmol/L,引物0.36μmol/L,Taq DNA聚合酶0.06 U/μL,模板DNA 40 ng.所建立的体系稳定可靠,适用于剑豆后续的SRAP分析.

关 键 词:剑豆  SRAP-PCR  均匀设计  优化
收稿时间:2014/2/21 0:00:00

Establishment and optimization of SRAP-PCR system in Canavalia ensiformis
LIU Mingqian,CHEN Lijun,OU-YANG Kungxi,DING Meimei and CHEN Xiaoyang.Establishment and optimization of SRAP-PCR system in Canavalia ensiformis[J].Journal of South China Agricultural University,2015,36(1):75-78.
Authors:LIU Mingqian  CHEN Lijun  OU-YANG Kungxi  DING Meimei and CHEN Xiaoyang
Abstract:
Keywords:Canavalia ensiformis  SRAP-PCR  uniform design  optimization
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