| 利用TALEN系统对兔进行Tiki1基因敲除 |
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| 引用本文： | 吴彩霞,刘朝明,颜泉梅,张全军,欧阳振,赵宇,樊娜娜,赖良学.利用TALEN系统对兔进行Tiki1基因敲除[J].华南农业大学学报,2020,41(3):9-14. |
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| 作者姓名： | 吴彩霞 刘朝明 颜泉梅 张全军 欧阳振 赵宇 樊娜娜 赖良学 |
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| 作者单位： | 中国科学院广州生物医药与健康研究院,广东广州 510530;吉林大学动物医学学院,吉林长春 130062;中国科学院广州生物医药与健康研究院,广东广州 510530 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划（2017YFA0105100）；973计划（2011CB944200） |
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| 摘 要： | 【目的】利用转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)系统获得Tiki1基因敲除的兔模型,为研究Tiki1对动物早期发育作用机理提供兔源的动物模型。【方法】基于TALEN系统设计了靶向兔Tiki1基因的打靶载体,分别将10和50 ng/μL的Tiki1-TALEN mRNA注射到原核期的家兔受精卵胞质中,然后收集发育至囊胚期的胚胎,鉴定囊胚率和基因修饰效率,通过测序检验囊胚的基因突变。为了进一步获得Tiki1基因敲除兔,后续将50 ng/μL的Tiki1-TALEN mRNA注射到17个原核期的家兔受精卵胞质中,将受精卵分别移植到2只受体兔体内。【结果】注射50 ng/μL Tiki1-TALEN mRNA试验组的囊胚率(64%)与注射10 ng/μL Tiki1-TALEN mRNA试验组的囊胚率(57%)差异不大,但注射50 ng/μL Tiki1-TALEN mRNA试验组的囊胚基因修饰效率(100%)显著高于注射10 ng/μL Tiki1-TALEN mRNA试验组的囊胚基因修饰效率(14.3%)。测序结果表明,Tiki1基因的突变范围从1到28 bp缺失不等。经过胚胎移植共生出3只仔兔,其中有2只兔子能检测到基因突变。【结论】所建立的TALEN技术体系可以对家兔Tiki1基因进行高效的敲除。
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| 关 键 词： | 兔 TALEN Tiki1基因 囊胚 基因敲除 基因修饰 |
| 收稿时间： | 2019/8/7 0:00:00 |
Gene knockout of Tiki1 gene in rabbit by TALEN system |
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| WU Caixi,LIU Zhaoming,YAN Quanmei,ZHANG Quanjun,OUYANG Zhen,ZHAO Yu,FAN Nan,LAI Liangxue.Gene knockout of Tiki1 gene in rabbit by TALEN system[J].Journal of South China Agricultural University,2020,41(3):9-14. |
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| Authors: | WU Caixi LIU Zhaoming YAN Quanmei ZHANG Quanjun OUYANG Zhen ZHAO Yu FAN Nan LAI Liangxue |
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| Institution: | Guangzhou Institutes of Biomedicine and Health, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510530, China;College of Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rabbit TALEN Tiki1 gene blastocyst gene knockout gene modification |
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