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邻苯二甲酸二丁酯人工抗原的制备及免疫鉴定
引用本文:郑盛武,赖丹,赵肃清.邻苯二甲酸二丁酯人工抗原的制备及免疫鉴定[J].华南农业大学学报,2016,37(2):107-112.
作者姓名:郑盛武  赖丹  赵肃清
作者单位:广东工业大学轻工化工学院,广东广州,510006
基金项目:国家自然科学基金(41271340);广东省自然科学基金(2013040013021, S2013030013338)
摘    要:【目的】制备并鉴定1种新型邻苯二甲酸二丁酯人工抗原。【方法】以4-硝基邻苯二甲酸为原料,经过酯化、还原生成4-氨基邻苯二甲酸二丁酯(DBAP),DBAP再与戊二酸酐反应,衍生生成4-戊二酸单酰邻苯二甲酸二丁酯(DBCP)。将合成的半抗原衍生物DBCP通过活性酯法与牛血清蛋白(BSA)或卵清蛋白(OVA)偶联,得到人工抗原。通过免疫新西兰大白兔获得抗血清,经间接竞争酶联免疫法(ic ELISA)检测抗体特异性。【结果】经质谱、氢核磁共振谱图鉴定,半抗原衍生物合成成功,经紫外光谱、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫试验证实偶联成功,并计算得出DBCP与载体蛋白BSA和OVA的结合比分别为11∶1和17∶1。经ic ELISA法检测,兔1和兔2的血清效价均达到1∶128 000,IC50分别为301和308 ng·m L-1,反应特异性较好。【结论】半抗原衍生物的合成是方便、安全的。邻苯二甲酸人工抗原的成功制备使获得DBP多克隆抗体以及建立DBP免疫分析方法成为可能。

关 键 词:邻苯二甲酸二丁酯  人工抗原  光谱  免疫鉴定
收稿时间:2015/5/25 0:00:00

Synthesis and identification of artificial antigen for dibutyl phthalate
ZHENG Shengwu,LAI Dan and ZHAO Suqing.Synthesis and identification of artificial antigen for dibutyl phthalate[J].Journal of South China Agricultural University,2016,37(2):107-112.
Authors:ZHENG Shengwu  LAI Dan and ZHAO Suqing
Institution:Department of Chemical Engineering and Light Industry, Guangdong University of Technology,,Department of Chemical Engineering and Light Industry, Guangdong University of Technology, and Department of Chemical Engineering and Light Industry, Guangdong University of Technology,
Abstract:
Keywords:dibutyl phthalate  artificial antigen  spectrum  immunity identification
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