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具生物活性的重组鸡催乳素的制备
引用本文:岳光芳,陈益填,刘颖,李万利,施振旦.具生物活性的重组鸡催乳素的制备[J].华南农业大学学报,2009,30(1).
作者姓名:岳光芳  陈益填  刘颖  李万利  施振旦
作者单位:1. 华南农业大学,动物科学学院,广东,广州,510642
2. 广东省家禽科学研究所,广东,广州,510440
基金项目:国家自然科学基金,教育部高等学校博士学科点专项科研基金 
摘    要:将鸡催乳素(PRL)成熟肽cDNA片段插入原核表达载体pRSETA的NheI和Hind III位点之间,构建重组表达质粒pPRL-SCAU.将此质粒转化大肠杆菌Escherichia coli菌株BL21(DE3),将重组菌在含氨苄青霉素的LB培养基中培养,再经IPTG诱导,可以诱导表达相对分子质量约为24 500的重组鸡PRL.经0.1 mmol/L IPTG诱导4 h后,表达量达到最高,占总菌体蛋白的30%左右.表达的重组鸡PRL含组氨酸标记,以包涵体形式存在,可经50%Ni-NTA树脂分离纯化,然后在透析复性后分离出可溶性部分.将此可溶性重组鸡PRL对3月龄的鸽子在左侧嗉囊处相同位置隔24 h2次皮内注射,能够显著促进嗉囊上皮的增生.与天然鸡催乳素的增生效果相比,所表达的重组鸡PRL的生物学活性为天然催乳素的17%至25%.

关 键 词:鸡PRL融合蛋白  表达和纯化  复性  生物活性

Preparation of Bioactive Recombinant Chicken Prolactin
YUE Guang-fang,CHEN Yi-tian,LIU Ying,LI Wan-li,SHI Zhen-dan.Preparation of Bioactive Recombinant Chicken Prolactin[J].Journal of South China Agricultural University,2009,30(1).
Authors:YUE Guang-fang  CHEN Yi-tian  LIU Ying  LI Wan-li  SHI Zhen-dan
Abstract:
Keywords:recombinant chicken PRL  expression and purification  renaturation  biological activity
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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