| 不同逆转录载体系统应用于水牛胎儿成纤维细胞转基因的探索 |
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| 引用本文： | 邓彦飞,刘真真,李云芳,刘庆友,罗 婵,杨素芳,石德顺.不同逆转录载体系统应用于水牛胎儿成纤维细胞转基因的探索[J].华南农业大学学报,2013,34(4):558-563. |
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| 作者姓名： | 邓彦飞 刘真真 李云芳 刘庆友 罗 婵 杨素芳 石德顺 |
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| 作者单位： | 广西大学 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，;广西大学 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，;广西大学 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，;广西大学 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，;广西大学 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，;广西大学 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，;广西大学 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室， |
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| 基金项目： | 863计划项目（2011AA100607）；国家自然科学基金（30960251）；广西教育厅资助项目（200911MS12）；广西大学科研基金项目（XBZ120572） |
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| 摘 要： | 采用2种不同的逆转录病毒载体系统（pMX和pMSCV），构建携带绿色荧光蛋白（EGFP）基因的重组载体，探索能高效感染水牛胎儿成纤维细胞（BFFs）的病毒系统和感染方法.结果发现，2种逆转录病毒系统包装出的重组病毒滴度都能达到106，将pMX病毒系统生产的重组病毒经超速离心浓缩后，滴度可达到107；2种重组病毒都能感染BFFs，但pMX系统比pMSCV系统更能有效地感染BFFs；通过对病毒的感染方式进行比较，发现使用新鲜病毒连续感染BFFs 2次（每次间隔12 h），或者经过超速离心浓缩后的病毒感染BFFs 1次，可以显著提高感染效率.
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| 关 键 词： | 逆转录病毒载体 转基因 水牛 胎儿成纤维细胞 |
| 收稿时间： | 3/9/2013 12:00:00 AM |
Infection of Buffalo Fetal Fibroblasts by Two Retrovirus Systems |
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| DENG Yanfei,LIU Zhenzhen,LI Yunfang,LIU Qingyou,LUO Chan,YANG Sufang and SHI Deshun.Infection of Buffalo Fetal Fibroblasts by Two Retrovirus Systems[J].Journal of South China Agricultural University,2013,34(4):558-563. |
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| Authors: | DENG Yanfei LIU Zhenzhen LI Yunfang LIU Qingyou LUO Chan YANG Sufang and SHI Deshun |
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| Institution: | State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources,Guangxi University,;State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources,Guangxi University,;State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources,Guangxi University,;State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources,Guangxi University,;State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources,Guangxi University,;State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources,Guangxi University,;State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-bioresources,Guangxi University, |
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| Abstract: | After two retroviral systems with enhanced green fluorescent protein (EGFP) report gene were constructed in this study, the retroviral systems and the infection method suitable for buffalo fetal fibroblasts (BFFs) were investigated. The results revealed that the retrovirus titer of the two systems was 106, and the titer of the pMX system could be up to 107 after ultracentrifugation concentration. The infection efficiency of pMX retroviral system was higher than that of the pMSCV retroviral system. Using the fresh retrovirus infected BFFs twice (12 h interval) or ultracentrifugal retrovirus infected BFFs once could improve the infection efficiency. |
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